Diagrama PCR

Flussdiagrammknoten

• Reacción en cadena de la polimerasa convencional

• Preparar

• Una cantidad de la mezcla maestra suficiente para 6 muestras de ADN

• Añadir

• Los reactivos especiales para el experimento en el tubo de la mezcla maestra

• Colocar

• 243 μl de agua destilada

• Añadir

• 30 μl de la memoria intermedia de PCR 10X que contiene MgCl2

• Utilizar

• 6 μl de los 10 Mm dNTPs

• Agregar

• 6 μl de la impresión hacia adelante,  6 μl de la impresión en reversa y 3 μl de la Taq ADN polimerasa

• Mezcla maestra

• Añadir

• 49 μl de la mezcla maestra

• Preparar

• Muestra de ADN.

• 1 μl de cada muestra de ADN.

• Colocar

• Los eppendorf en el termociclador

• Realizar

• Una desnaturalización de inicialización a 94 grados centígrados durante 5 minutos por un ciclo.

• Realizar

• La desnaturalización, a 94 grados centígrados durante 30 segundos, la fase de recocido a 50-65 grados centígrados durante 30 segundos y el alargamiento a 72 grados centígrados durante un minuto por  30 ciclos.

• Elongación

• La elongación final a 72 grados centígrados durante 10 minutos para un ciclo

• Realizar

• Fijar

•  A cuatro grados centígrados por un tiempo indefinido durante un ciclo.