RT PCR METHOD

Flussdiagrammknoten

• Metodología a seguir para detección de ARNm de VPH 

• 1.-Se toman muestras  del cervix y se almacenaron a (-80ºC)

• 2.- El ARN de todas las células se preparó usando Trizol (Life Technologies, Carlsbad, CA) d

• 3.- Se preparan ADNc (complementario) en sistema de síntesis de primera cadena SuperScript III para RT-PCR 

• 4.- Uso de PCR semicuantitativa para amplificar simultáneamente el ADNc celular de GAPDH y HPV L1.

• 5.-Analisis de muestras 

• Uso de centrifugación para sedimentar ARN

•    Analisis de pureza por AGILENT 2100

• Rtpcr Cebadores (binary/octet-stream)

• síntesis de ADNc se realizó en ácido nucleico extraído tratado con DNase-treated 

• TRANSCRIPCIÓN INVERSA 

• Se multiplicaron las cadenas de ADNc 

• REPLICACIÓN DE ADNc 

• Se usaron cebadores y primers para determinar la cantidad en tiempo real de carga viral  (ARNm) 

• Rtpcr Dogma (binary/octet-stream)

• Captura1 (binary/octet-stream)

• Captura2 (binary/octet-stream)

• Captura4 (binary/octet-stream)