Zusammenfassung der Ressource
Técnicas de Biología Molecular deácidos
nucleicos
- Técnicas de
extracción de
ADN
- Lisis por ruptura mecánica y
extracción con disolventes
orgánicos
- Lisado y purificación con un
detergente iónico. Método del CTAB
- Método de salting-out
- A partir de un lisado celular se
pueden separar las moléculas de
proteínas y otros contaminantes
del ADN mediante la adición de
altas concentraciones de sal que
hacen que disminuya la
solubilidad de las moléculas
orgánicas en la fase acuosa.
- Método de extracción de ADN con
yoduro de sodio como agente
caotrópico en un único tubo
- Técnicas de
ampliación de ADN
- qPcr multiplex
- Es una variante de la PCR donde
se amplifican de forma
simultánea en el mismo tubo,
distintas secuencias específicas
- qPCR
- La PCR de tiempo real o
cuantitativa, es una variante que
se utiliza para cuantificar la
amplificación de una secuencia
de DNA o mRNA de una muestra
- RT-PCR
- La PCR con retrotranscriptasa es
una variante de la PCR diseñada
para detectar y amplificar
muestras de RNA
- Técnicas de
purificación de ADN
- Cromatografía de
intercambio iónico
- Su mecanismo básico es el
intercambio reversible de los
iones en solución con los grupos
funcionales unidos
covalentemente a una fase
estacionaria insoluble llamada
resina
- Comprobación de la integridad del ADN
por electroforesis
- conocer la cantidad y calidad del ADN por espectrofotometría, es importante conocer si el ADN
obtenido está integro meidnate electroforesis en gel de agarosa o poliacrilamida al 5%
- Cromatografía de
permeabilidad
- Separa macromoléculas
disueltas por tamaño con
base en su elución desde
columnas llenas de un gel
poroso