Zusammenfassung der Ressource
Inclusion de tejidos en parafina
- Los tejidos fijados adquieren cierta consistencia y dureza,
pero no la suficiente para que, de ellos, se obtengan secciones
delgadas. Estas secciones, del orden de algunas milésimas de
milímetro (5 a 10 m), se conseguirán cuando los tejidos se
infiltren con sustancias denominadas “de inclusión” y
adquieran tal dureza que sometidos al filo de una navaja
produzcan secciones, cortes o láminas sumamente delgados y
transparentes
- ORIENTACIÓN DE TEJIDOS PARA SU INCLUSIÓN.
- Consideraciones generales.
- Estructuras tubulares.
- Estructuras quísticas
- Identificación de márgenes y
superficies
- Los tejidos que tienen los márgenes marcados con
tinta china o con colorante deben ser colocados en
una forma tal que la tinta se pueda ver en el borde de
la sección. Si hay secciones múltiples, estas deben
ser incluidas con la tinta siempre mirando hacia el
mismo lado del bloque para que las láminas queden
mejor organizadas y para facilitar su estudio bajo el
microscopio
- Superficies epiteliales.
- Aquellos tejidos que tienen una superficie epitelial, como
la piel, el intestino, la vesícula biliar, la vejiga urinaria y el
útero, deben ser colocados en forma tal que el plano de
sección pase a través de todas las capas del tejido. La
superficie epitelial debe colocarse en la parte más alta del
bloque para que así sea la última en ser cortada. El acto de
llegar al epitelio al final de la moción de corte va a
minimizar la presión que es causa de distorsión de la capa
epitelial.
- Especímenes grandes y sólidos.
- Los especímenes rectangulares grandes o
sólidos como el útero, la próstata, la glándula
tiroides, y el tejido óseo deben ser incluidos
con un ligero ángulo en relación al borde de la
cuchilla. Esta comienza el corte con menos
resistencia, reduciendo así la posibilidad de
desplazar el tejido fuera del bloque. La
vibración e inestabilidad del borde de la
cuchilla o del bloque también se minimizan
notablemente
- Múltiples Especímenes:
- Múltiples fragmentos de tejidos blandos y ganglios
linfáticos deben ser colocados uno junto al otro
con suficiente espacio entre ellos. Si los tejidos se
colocan uno encima del otro, existe la posibilidad
de que el tejido de abajo distorsione el tejido que
está encima
- Después de la disección, los quistes pequeños adoptan
una forma de cúpula. Por lo tanto, los quistes deben ser
incluidos con la superficie de corte hacia abajo para que
así la cuchilla corte a través de todas las capas de la pared
del quiste. Hay que asegurarse de que la cúpula no atrape
burbujas de aire.
- Estructuras tubulares tales como vaso deferente, venas,
arterias y oviducto deben ser incluidas en una forma tal
que la cuchilla corte a través de la luz tubular. La
orientación debería ser tan vertical corno sea posible. La
cuchilla, entonces, deberá hacer los cortes en una forma
que sea perpendicular al eje longitudinal del tubo
- Las secciones de tejido son incluidas perfectamente
planas para asegurarse de que se obtenga una sección
completa. Use la presión justa para mantener la
sección plana contra la superficie del molde. Debe
tenerse mucho cuidado para que después no aparezcan
artefactos causados por un manejo inadecuado de las
muestras de tejido
- ESTACION DE INCLUSION DE TEJIDOS EN
PARAFINA
- La forma más sencilla es usar un molde en el que se vierte la parafina
y en el que se introduce la muestra procesada y se deja enfriar para
que el conjunto se solidifique. En muchos laboratorios se utiliza una
estación a tal efecto.
- Estas estaciones disponen
de depósito de parafina
líquida (600C), desde el que
se puede dispensar
parafina sobre el molde
mediante un grifo; dispone
también de una cámara
donde se guardan los
diferentes moldes a 600C y
una placa caliente (600C) y
otra fría (40C).
- La dinámica es sencilla, se coloca
el molde debajo del grifo
dispensador de parafina y se llena
con parafina líquida, se coloca la
pieza y se orienta, colocando, por
último, la base del casete de
inclusión. Se desplaza con cuidado
el conjunto encima de la placa fría
para conseguir una solidificación
rápida que no forme cristales y
una vez solidificado se extrae el
molde obteniendo un bloque listo
para cortar.
- ENCASTRACIÓN EN
PARAFINA
- Las muestras de tejidos están encastradas en bloques de
parafina (o PEG) usando contenedores disponibles en plástico
o porcelana, discos de aluminio, o en "botes hechos con papel".
Cuando uses estos métodos, extiende una fina capa de aceite
de parafina en la superficie antes de vaciar la parafina líquida
para permitir que se desmonte más fácilmente el bloque de
parafina.
- La encastración de tejidos inhibidos con parafina se realiza más
fácilmente sobre una plataforma de encastración. Esta es una
superficie simple de aluminio, que tiene una de sus superficies
calentadas y no la otra. Cuando está caliente, el lado calentado
mantiene la parafina líquida permitiendo que el tejido pueda ser
orientado