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Cultivo Celular

Beschreibung

Mindmap am Cultivo Celular, erstellt von AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA am 16/07/2021.
AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA
Mindmap von AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA, aktualisiert more than 1 year ago
AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA
Erstellt von AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA vor etwa 3 Jahre
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Zusammenfassung der Ressource

Cultivo Celular
  1. Inicio
    1. Siembra
      1. Agregar en un tubo cónico de 50mL el Medio RPMI-1640, el Suero Fetal Bovino (SFB), L-glutamina y los antibióticos.
        1. Homogenizar
          1. Filtrar y trasladar 9mL del medio con suplementos en un tubo cónico de 15mL
            1. Agregar 100L de fitohemaglutina
              1. Agregar 1mL de sangre
                1. Homogenizar
                  1. Incubar a 37°C por 72 horas
                    1. Cosecha
                      1. Agregar 100L de colchicina (concentración de colchicina: 10g/mL).
                        1. Incubar por 10 minutos a 37°C.
                          1. Centrifugar 4000rpm por 8mins. y resuspender en 10mL de KCl 75 micro M
                            1. Dejar incubar 20 minutos a 37°C.
                              1. Centrifugar 4000rpm por 8mins. y descartar el sobrenadante
                                1. Agregar 1mL de FIX a 4°C, gota a gota hasta completar 10mL.
                                  1. Incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
                                    1. Centrifugar 4000rpm por 8mins. y descartar sobrenadante dejando micro1mL
                                      1. Agregar 10mL de FIX a 4°C, gota a gota el primer mililitro.
                                        1. Incubar 5 minutos a temperatura ambiente y centrifugar a 4000rpm por 8mins.
                                          1. Descartar el sobrenadante y dejar 1mL y resuspender
                                            1. Rotular con número de mesa y sección, y guardar a -20°C.
                                              1. FIN
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