Zusammenfassung der Ressource
INMUNOANÁLISIS
- Conceptos relacionados
- Anticuerpo (AC)
- Es una molecula bi-funcional que
se une a los antigenos y ayudar a
combatir infecciones y protegerlo
- Antígeno (AG)
- sustancia que puede ser
reconocida por los
receptores del sistema
inmunitario adaptativo
- Reacción inmunológica
- Es aquella en la cual un antígeno es
reconocido por su respectivo Anticuerpo.
En esta se presenta una avidez y
especificidad, determinadas por fuerzas de
atracción y condicionadas por las
concentraciones de ambas moléculas de
dicha reacción
- Cinética de las
reacciones AC-AG
- Tipos de reacciones
- Interacción primaria
- interacción química específica entre
los anticuerpos producidos por las
células B de los glóbulos blancos y
los antígenos durante la reacción
inmune.
- Interacción secundaria
- Precipitaciones,
floculación, aglutinación,
fijación del complemento
- Interacción tercearia
- Son las que tienen lugar en
interacciones biológicas, por
ejemplo, la activación del
sistema del complemento, la
opsonización, fagocitosis, entre
otras
- Principios generales
del Inmunoanálisis
- Los inmunoanálisis son
técnicas empleadas para
detectar y cuantificar los
Antígeno y los Antícuerpos.
- Clasificación de métodos de inmunoanálisis
- Inmunoanálisis de partículas
- Se emplean en partículas como
eritrocitos, armazones de látex y
de poliglicilmetacriato, sales de
oro y sales de colorante en
dispersión, como marcadores
para el antígeno y el antícuerpo.
- Pruebas de
aglutinación de
particulas
- La aglutinación es una reacción
serológica clásica que comprende la
aglomeración de una suspensión
celular mediante un anticuerpo
específico
- Aglutinación indirecta o pasiva
- Las células o partículas inertes son
portadores pasivos y los antígenos
pueden ser absorbidos físicamente
o acoplados covalentemente a la
superficie.
- Aglutinación directa
- Es una reacción clásica que comporta la aglomeración de
células o de una suspensión de partículas insolubles, como
bacterias, hongos u otros organismos, mediante anticuerpos
específicos. La agregación se produce por anticuerpos que
poseen dos o más receptores de conjugación para fijar las
células o partículas
- Prueba de Antiglobulina
(prueba de Coombs)
- Los Anticuerpos incompletos como la
IgG anti- Rhᵒ no producen
aglutinación en una suspensión
salina de eritrocitos homólogos
- Enzimoinmunoanálisis (EIA)
- Se emplea una enzima
como marcador para la
detección de Antígenos o
Antícuerpos
- Heterogéneo: La reacción
ag-ac no modifica la
actividad del marcador
enzimático
- ELISA: La actividad enzimática en la fracción
unida y la libre se cuantifica por la conversión
de un producto catalizado por la enzima
- ELISA competitivo
- Con empleo de antigeno
marcado por una enzima
- Mediante conjugados de
enzima-antícuerpo
- ELISA no competitivo
- Tipo "Sandwich": El anticuerpo
inmovilizado en fase sólida se incuba
con el antígeno estandar o de prueba
- Homogéneo: Modula la
actividad de la enzima
- Análisis con Antígeno: la sustancia para
analizar se marca por unión covalente con la
enzima y el anticuerpo frente al analizado
determina la actividad de la enzima
- Análisis con sustrato: se marca por enlace
covalente el sustrato enzimático con un
producto a analizar, de forma que la union del
sustrato y anticuerpo inhiba estéricamente la
enzima, impidiendole actuar sobre el sustrato
- Análisis con co-factor: unión covalente de un
antígeno o producto a analizar con un cofactor
enzimático y se vita que el anticuerpo se combine
con la apoenzima adecuada.
- ELISA
- Análisis de Inmunoabsorción
Enzimática
- EMIT
- Técnica de Inmunoanálisis
con Multiplicación Enzimática
- Inmunoanálisis por fluorescencia (FIA)
- Cuando una molécula de esta clase se irradia con luz
de longitud de onda adecuada, quedan exitados los
electrones dentro de la molecula y cambian hacia un
estado de mayor energía
- Heterogéneos
- FIA en fase solida
- - Método indirecto - Método
competitivo - Método sandwich -
Método fluoroinmunométrico
- FIA por concentración de particulas
- Análisis inmunofluorométrico
- Homogéneos
- Aumento o disminución de la
fluorescencia de los haptenos por el
anticuerpo
- FIA con sustrato marcado
- Radioinmunoanálisis (RIA)
- RIA competitivo
- Sigue las leyes de acción de masas, que especifica
las relaciones entre la sustancia problema y las
proteínas de unión, el anticuerpo o el receptor.
- RIA no competitivo
- Conocido como análisis
inmunoradiométricos (IRMA) o
tipo sándwich y aquí se emplea
un exceso de anticuerpo.