EXTRACCIÓN DE ADN

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sofia manzano
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sofia manzano
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Zusammenfassung der Ressource

EXTRACCIÓN DE ADN
  1. INTRODUCCIÓN
    1. Moléculas con información genética
      1. Funcionamiento orgánico
        1. Estructura molecular
            1. Aislar cadenas de ADN
                1. Primidinas
                  1. Citosina
                    1. Timina
                    2. Purinas
                      1. Adenina
                        1. Guanina
            2. MATERIALES (Estudiante)
              1. Muestra vegetal o animal
                1. Batidora o picadora
                  1. Cloruro de sodio
                      1. Atracción de cargas (Soluble en agua)
                    1. Detergente liquido o shampoo
                        1. Disuelve (Lípidos)
                          1. Separa (Proteinas rodeando el ADN)
                        2. Colador
                          1. Ablanda carnes o zumos de piña o papaya
                          2. MATERIALES (Docente)
                            1. Agua destilada o mineral
                              1. Bicarbonato sodico
                                1. Varilla fina
                                  1. Tubos de ensayo
                                    1. Vaso de precipitados
                                      1. Pipeta de 10 ml
                                        1. Alcohol isoamilico y etilico a 0°
                                          1. Nevera
                                          2. Desarrollo de la práctica
                                            1. Método 1
                                              1. 1.Disolver 5g de NaCl en H2O
                                                  1. 2. Pesar 250g de material vegetal o animal
                                                    1. Impulsos hasta obtener macerado (10')
                                                      1. 3. Filtrar macerado
                                                        1. 4. Agregarlo a solución salina fria
                                                          1. Añadir 30 ml detergente y reposo (5min)
                                                            1. 5. Añadir a tubo de ensayo mezcla (10ml)
                                                              1. Añadir 0.5g de Ablandador y agitar
                                                                1. 6. Tubo inclinad, añadir alcohol isoamílico (10ml)
                                                                  1. Reposo (5min)
                                                                    1. 7. Observar fragmentos de ADN enrollados (mayor tamaño)
                                                        2. Método 2
                                                          1. 1. Preparar solución buffer
                                                            1. - 120ml agua destilada - 1.5g NaCl - 5ml NaHCO3 -5ml detergente
                                                              1. 2. Cortar muestra que proporciona ADN
                                                                1. Trituralrla (impulsos=10')
                                                                  1. 3. Mezclar: 20ml triturado celular - 40ml buffer frio
                                                                    1. Agitar fuertemente (2min) y filtrar restos vegetales
                                                                      1. 4. Agregar: 0.5g ablandador
                                                                        1. 5. 10ml de mezcla obtenida y depositar en tubo de ensayo
                                                                          1. Tubo inclinado: añadir 10ml alcohol isoamílico
                                                                            1. 6. Observar fragmentos de ADN enrrollados (mayor tamaño)
                                                                  2. Método 3
                                                                    1. 1. Mezclar; 1.5g NaCl - 5g NaHCO3 - 120ml Agua - 5ml Detergente
                                                                      1. Mantenerlo frio
                                                                        1. 2. Transferir 15ml de solución a tubo de ensayo
                                                                          1. Escupir 10 veces en sobre ella y mezclar
                                                                            1. 3. Tubo inclinado: Añadir 15ml alcohol isoamilico
                                                                              1. 4. Observar fragmentos de mayor tamaño de ADN enrrollados
                                                                        2. Método 4
                                                                          1. 1. Vaso de agua: Disolver una cucharadita de NaCl y 3g Detergente
                                                                            1. 2. Agregar a la solución trozos de la parte central de cebolla
                                                                              1. 3. Adicionar mezcla a licuadora y accionar (30')
                                                                                1. 4. Obtener extracto y agregarlo a un tubo (1/4)
                                                                                  1. 5. Añadir zumo de piña y mezclar
                                                                                    1. 6. Agregar mismo volumen de alcohol
                                                                                      1. 7. Dejar reposar hasta que forme zona turbia entre ambas capas
                                                                                        1. 8. Extraer fibras blancas de ADN
                                                                          2. Método Alternativo (Tinción de Feulgen)
                                                                            1. 1. Desnaturalización de la cadena
                                                                              1. Separa purinas de las desoxirribosas (ADN)
                                                                              2. 2. Colocar muestra en portaobjetos e hidratar
                                                                                1. 3. Secar (1min)
                                                                                  1. 4. Aplicar reactivo Feulgen
                                                                                  2. 5. Observar coloración
                                                                                2. Preguntas
                                                                                  1. 1. Reactivos
                                                                                    1. Solución Buffer
                                                                                      1. Protege información genética (efecto tampón)
                                                                                      2. Alcohol
                                                                                        1. Purifica
                                                                                        2. Detergente
                                                                                          1. Rompe membranas (Disuelve lípidos - Separa proteínas)
                                                                                        3. 2. Tampón de solución
                                                                                          1. Mantener el pH estable
                                                                                            1. Solución amortiguadora
                                                                                            2. 3. Efecto del Alcohol
                                                                                              1. Purificación
                                                                                                1. Deshidratación
                                                                                              Zusammenfassung anzeigen Zusammenfassung ausblenden

                                                                                              ähnlicher Inhalt

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                                                                                              Francisco Rivera
                                                                                              Repaso de Revalida Enfermeria 2015
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                                                                                              acordon17
                                                                                              Soluciones Químicas
                                                                                              Soluciones Quími
                                                                                              2_Soluciones Químicas
                                                                                              Lino Mauricio Rodríguez Aramburo
                                                                                              "Consumo de sustancias psicoactivas"
                                                                                              Carolina Escobar
                                                                                              Repaso de Revalida Enfermeria 2015
                                                                                              Iancarlos Vazquez
                                                                                              Crescimento e renovação celular
                                                                                              Carlos Rocha
                                                                                              Síntesis del ADN
                                                                                              Diego Araujo
                                                                                              La Celula
                                                                                              Dra Carolina Gar