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EXTRACCIÓN DE ADN
Beschreibung
and soluciones
Keine Merkmale angegeben
adn
reactivos soluciones
soluciones
Mindmap von
sofia manzano
, aktualisiert more than 1 year ago
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Erstellt von
sofia manzano
vor etwa 9 Jahre
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Zusammenfassung der Ressource
EXTRACCIÓN DE ADN
INTRODUCCIÓN
Moléculas con información genética
Funcionamiento orgánico
Estructura molecular
Aislar cadenas de ADN
Primidinas
Citosina
Timina
Purinas
Adenina
Guanina
MATERIALES (Estudiante)
Muestra vegetal o animal
Batidora o picadora
Cloruro de sodio
Atracción de cargas (Soluble en agua)
Detergente liquido o shampoo
Disuelve (Lípidos)
Separa (Proteinas rodeando el ADN)
Colador
Ablanda carnes o zumos de piña o papaya
MATERIALES (Docente)
Agua destilada o mineral
Bicarbonato sodico
Varilla fina
Tubos de ensayo
Vaso de precipitados
Pipeta de 10 ml
Alcohol isoamilico y etilico a 0°
Nevera
Desarrollo de la práctica
Método 1
1.Disolver 5g de NaCl en H2O
2. Pesar 250g de material vegetal o animal
Impulsos hasta obtener macerado (10')
3. Filtrar macerado
4. Agregarlo a solución salina fria
Añadir 30 ml detergente y reposo (5min)
5. Añadir a tubo de ensayo mezcla (10ml)
Añadir 0.5g de Ablandador y agitar
6. Tubo inclinad, añadir alcohol isoamílico (10ml)
Reposo (5min)
7. Observar fragmentos de ADN enrollados (mayor tamaño)
Método 2
1. Preparar solución buffer
- 120ml agua destilada - 1.5g NaCl - 5ml NaHCO3 -5ml detergente
2. Cortar muestra que proporciona ADN
Trituralrla (impulsos=10')
3. Mezclar: 20ml triturado celular - 40ml buffer frio
Agitar fuertemente (2min) y filtrar restos vegetales
4. Agregar: 0.5g ablandador
5. 10ml de mezcla obtenida y depositar en tubo de ensayo
Tubo inclinado: añadir 10ml alcohol isoamílico
6. Observar fragmentos de ADN enrrollados (mayor tamaño)
Método 3
1. Mezclar; 1.5g NaCl - 5g NaHCO3 - 120ml Agua - 5ml Detergente
Mantenerlo frio
2. Transferir 15ml de solución a tubo de ensayo
Escupir 10 veces en sobre ella y mezclar
3. Tubo inclinado: Añadir 15ml alcohol isoamilico
4. Observar fragmentos de mayor tamaño de ADN enrrollados
Método 4
1. Vaso de agua: Disolver una cucharadita de NaCl y 3g Detergente
2. Agregar a la solución trozos de la parte central de cebolla
3. Adicionar mezcla a licuadora y accionar (30')
4. Obtener extracto y agregarlo a un tubo (1/4)
5. Añadir zumo de piña y mezclar
6. Agregar mismo volumen de alcohol
7. Dejar reposar hasta que forme zona turbia entre ambas capas
8. Extraer fibras blancas de ADN
Método Alternativo (Tinción de Feulgen)
1. Desnaturalización de la cadena
Separa purinas de las desoxirribosas (ADN)
2. Colocar muestra en portaobjetos e hidratar
3. Secar (1min)
4. Aplicar reactivo Feulgen
5. Observar coloración
Preguntas
1. Reactivos
Solución Buffer
Protege información genética (efecto tampón)
Alcohol
Purifica
Detergente
Rompe membranas (Disuelve lípidos - Separa proteínas)
2. Tampón de solución
Mantener el pH estable
Solución amortiguadora
3. Efecto del Alcohol
Purificación
Deshidratación
Medienanhänge
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