Zusammenfassung der Ressource
Trabajar con Proteínas
- Para poder estudiar una proteína se la separa del resto para obtener conocimientos de sus propiedades
- La proteínas se pueden separar y purificar
- determinar propiedades y actividades
- ¿Cómo se purifica una proteína?
- Separación de proteínas
- Clonaje de DNA
- Proceso de purificación de
proteínas
- Se basa en métodos como:
- Rotura de células para liberar proteínas
- Solución extracto crudo
- Tratamientos que separa a las proteínas en diferentes fracciones
- Utilizan diferentes en la solubilidad de proteínas
- Adición de ciertas sales
- Sulfato amónico
- Cromatografía
- Cromatografía de intercambio iónico
- Aprovecha diferencias en el signo y magnitud de cargas eléctricas
- Cromatografía en columna
- Diferencias de carga, tamaño, afinidad de unión
- Cromatografía de intercambio catiónico
- solido migra a la carga negativa
- Electroforesis
- Desplazamiento de proteínas
cargadas en un campo eléctrico
- lleva a cabo generalmente a geles
por el polímero entrecruzado por
poliacrilamida
- El desplazamiento de una proteína en
un gel durante un electrolisis por
función de su tamaño y forma
- se desplazan a traves del gel
cuando se aplica un campo
eléctrico
- Proteínas no aisladas
- En las proteínas enzimáticas se determina la
cantidad de enzimas de la solución en
función del efecto.
- Se debe conocer :
- Ecuación global
- Procedimiento analítico
- Si requiere confactores
- Dependecia de actividad
- pH ÓPTIMO
- Zona de temperatura