Resumo: Aula 1 - Microscopia Óptica

LICENCIATURA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – CEDERJ - UENF DISCIPLINA: BIOLOGIA CELULAR 1 SEGUNDO PERÍODO Resumo: Aula 1 - Microscopia Óptica O microscópio óptico é composto pelas seguintes partes: · Lente ocular; · Objetiva; · Platina; · Lente condensadora; · Fonte de iluminação; · Foco micromático e macromático. · O aumento final é obtido pela multiplicação da lente objetiva pela ocular. · Limite de resolução é o limite máximo que uma imagem pode ser aumentada sem perda de nitidez. Características que dificultam a visualização da célula: · São pequenas; · Em geral transparentes; · Muito hidratadas e frágeis; · Em órgãos e tecidos precisam ser cortadas em lâminas. Etapas do preparo de amostras para o microscópio óptico de campo: 1. Fixação: tratamento da amostra com substâncias químicas, como o formol. 2. Desidratação: substituição da água no interior da célula por solventes como o etanol ou metanol. 3. Microtomia: embebição em parafina de tecidos espessos como o fígado e músculos para posterior corte de lâminas após a solidificação da parafina. 4. Coloração: objetiva facilitar a identificação dos compartimentos celulares, sendo o azul de metileno um dos corantes utilizados. Tipos de microscópios ópticos: 1. De campo claro: é o microscópio padrão. Normalmente a amostra precisa ser fixada e corada para correta visualização. No entanto, ao fechar mais a passagem de luz pela condensadora, é possível observar amostras sem coloração. 2. De contraste de fase: dispensa o uso de corantes por utilizar um sistema de filtros que interfere no trajeto da luz, criando um contorno claro e escuro. 3. De contraste interferêncial: Também utiliza filtros para criar contrastes a partir de diferenças no trajeto da luz. No entanto as imagens amostradas ao contrário do microscópio de contraste de fase, amostram também relevos. 4. De fluorescência: utiliza luz ultravioleta e requer o uso de corantes fluorescentes. 5. Confocal de varredura: utilização em conjunto de uma fonte de luz visível, uma de ultravioleta e uma fonte de raio laser.