PRÁCTICAS BIOLOGÍA CELULAR 1

¿Cómo deben desecharse los líquidos con DAB?

Gestión de residuos: ¿Qué sustancias deben recuperarse en la misma botella en lugar de ser desechadas?

¿Cómo deben gestionarse los residuos de PBS y tampón de lisis?

Los cultivos celulares consisten en la experimentación con células en condiciones absolutamente [blank_start]controladas[blank_end]. Permiten: analizar [blank_start]interacciones[blank_end] entre varios tipos celulares, estudiar los efectos de [blank_start]adición[blank_end] o [blank_start]eliminación[blank_end] de moléculas y manipulaciones [blank_start]genéticas[blank_end].

Los cultivos celulares pueden realizarse en soportes de vidrio, pero estos no son reutilizables y deben desecharse en un contenedor específico

¿Qué sustancias se pueden utilizar para pretratar un soporte para un cultivo celular?

Los soportes de los cultivos celulares pueden ser de [blank_start]vidrio[blank_end] o [blank_start]plástico[blank_end] y en ocasiones deben ser pretratados para [blank_start]simular una matriz extracelular[blank_end]

¿Qué son los medios de cultivo?

Un medio de cultivo necesita

Los medios de cultivo necesitan bases como: [blank_start]azúcares[blank_end], [blank_start]aminoácidos[blank_end], [blank_start]sales minerales[blank_end] y vitaminas. Los medios de cultivo necesitan suplementos como: [blank_start]rojo fenol[blank_end], [blank_start]antibióticos[blank_end], [blank_start]suero fetal de ternera[blank_end] y aditivos específicos

¿Cómo se mantiene un medio de cultivo?

Las condiciones fisico-quimicas más favorables para un cultivo animal son

El riesgo de contaminación de un cultivo es muy alto, algunos posibles contaminantes son: bacterias, levaduras, micoplasmas y virus

Para hacer frente a las contaminaciones microbiológicas se utilizan antibióticos y antifúngicos

Las combinaciones de antibióticos y antifúngicos en un medio pueden ser: Penicilina y [blank_start]estreptomicina[blank_end] Penicilina, [blank_start]estreptomicina[blank_end] y [blank_start]funginona[blank_end] [blank_start]Gentamicina[blank_end] [blank_start]Kenamicina[blank_end], tylocina, quinolonas [blank_start]Amphotericina-B[blank_end]

Para esterilizar placas de plástico se utilizan

Para esterilizar material de disección, vidrio y plástico resistente se puede utlizar

La extracción de órganos y manipulación de cultivos debe realizarse en [blank_start]cabinas de flujo laminar[blank_end]

Los pasos para el procesamiento de tejidos son (en orden) [blank_start]Obtención[blank_end] [blank_start]Fijación[blank_end] [blank_start]Inclusión[blank_end] [blank_start]Seccionamiento[blank_end] [blank_start]Montaje[blank_end] [blank_start]Tinción[blank_end]

El fin de la fijación es evitar la [blank_start]degradación post-mortem[blank_end] del tejido, preservando la [blank_start]estructura[blank_end] y [blank_start]composición química[blank_end] de la muestra

La fijación física puede realizarse por [blank_start]desecación[blank_end] o [blank_start]congelación[blank_end] y la química utiliza [blank_start]entrecruzantes[blank_end], [blank_start]oxidantes[blank_end] y [blank_start]precipitantes[blank_end]

Los crioprotectores

La inclusión consiste en la sustitución del [blank_start]agua[blank_end] de la muestra por una sustancia dura, facilitando así su [blank_start]seccionamiento[blank_end]

Los medios hidrofóbicos de inclusión requieren una deshidratación previa del tejido con etanol en concentraciones crecientes solamente

Los medios hidrofóbicos requieren una deshidratación previa del tejido con:

La gelatina, el agar, el polietilenglicol y la poliacrilamida son medios [blank_start]hidrofílicos[blank_end] de inclusión

El montaje para la microscopía óptica se realiza en [blank_start]portaobjetos[blank_end] de vidrio y el montaje para microscopía electrónica se realiza en [blank_start]rejillas metálicas[blank_end]

Las tinciones convencionales se utilizan para [blank_start]estudios morfológicos[blank_end] y las tinciones específicas se utilizan para [blank_start]detectar moléculas determinadas[blank_end]

Las tinciones convencionales se basan en la afinidad [blank_start]quimica[blank_end] de los [blank_start]colorantes[blank_end] por las distintas moléculas [blank_start]ionizadas[blank_end] que integran las células.

Los colorantes son sales neutras que al disolverse en agua se disocian en:

Los colorantes que se disocian en aniones ácidos se unen a grupos [blank_start]básicos[blank_end] como el [blank_start]citoplasma[blank_end], los que se disocian en cationes básicos se unen a grupos [blank_start]ácidos[blank_end] como el [blank_start]ADN del núcleo[blank_end]

Hay dos tipos de cultivos: [blank_start]celulares[blank_end] y [blank_start]tisulares u organotípicos[blank_end]

¿A qué se le denomina senescencia?