1_UD 5: Técnicas de hibridación

Beschreibung

Técnicas de hibridación, tema 5
Judit Alsina Massons
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Judit Alsina Massons
Erstellt von Judit Alsina Massons vor etwa 8 Jahre
Judit Alsina Massons
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2

Zusammenfassung der Ressource

Frage 1

Frage
Las técnicas de hibridación, se pueden clasificar según el criterio el medio, o soporte en el que se llevan a cabo cuales són?
Antworten
  • En medio solido
  • En medio liquido
  • In situ
  • En medio quimico

Frage 2

Frage
Porque se caracterizan las tecnicas de hibridacion en soporte solido?
Antworten
  • Porque la secuencia diana o la sonda, se imobiliza en un soporte solido.
  • Porque el hibrido sonda/secuencia diana se forma en solución.
  • Porque se realizan directamente sobre extensiones citologicas o secciones de tejido.

Frage 3

Frage
Porque se caracterizan las tecnicas de hibridaccion in situ?
Antworten
  • Porque la secuencia diana o la sonda, se imobiliza en un soporte solido.
  • Porque el hibrido sonda/secuencia diana se forma en solución.
  • Porque se realizan directamente sobre extensiones citologicas o secciones de tejido.

Frage 4

Frage
Porque se caracterizan las tecnicas de hibridacion en medio liquido?
Antworten
  • Porque se realizan directamente sobre extensiones citologicas o secciones de tejido.
  • Porque el hibrido sonda/secuencia diana se forma en solución.
  • Porque la secuencia diana o la sonda, se imobiliza en un soporte solido.

Frage 5

Frage
Técnicas en medio solido
Antworten
  • Dot blot
  • Southern blot
  • Northen blot
  • Microarrays
  • Tecnica de captura de hibrido
  • Tecnologia de adn ramificado
  • Florescente (FISH)
  • Cromogénia (CISH)

Frage 6

Frage
Técnica en medio líquido:
Antworten
  • Tecnologia de ADN ramificado
  • Técnica de captura de hibrido
  • Southern blot
  • Cromogenica

Frage 7

Frage
Las técnicas de hibridación In situ són: La [blank_start]fluorescente[blank_end] (FISH) y la [blank_start]Cromogenica[blank_end] (Cish)
Antworten
  • fluorescente
  • Cromogenica

Frage 8

Frage
El Dot Blot, utiliza membranas de:
Antworten
  • Nitrocelulosa
  • Nailon
  • Plastico
  • Lisado

Frage 9

Frage
En el Dot Blot, la mezcla compleja de ADN y ARN, no aporta ninguna información adicional.
Antworten
  • True
  • False

Frage 10

Frage
En el Dot Blot, que tipo de gota se coloca directamente en la muestra que se va a analizar?
Antworten
  • Un acido nucleico purificado
  • Un lisado celular
  • Un producto de amplificación por PCR
  • Un lavado
  • Clorurio de Sodio

Frage 11

Frage
El Dot Blot, no permite un estudio simultaneo de varias muestras.
Antworten
  • True
  • False

Frage 12

Frage
En el Dot Blot, la técnica se lleva a cabo incubando secuencialmente las [blank_start]membranas[blank_end] con los reacitovs por inmersion de [blank_start]cubetas[blank_end], en [blank_start]bolsas de plastico termosellables[blank_end] o con cierre hermético o en [blank_start]frascos con tapón de rosca[blank_end].
Antworten
  • membranas
  • cubetas
  • bolsas de plastico termosellables
  • frascos con tapón de rosca

Frage 13

Frage
En las técnicas de hibridación se sigue un protocolo genérico que comienza con: 1. [blank_start]La aplicación de la membrana[blank_end], 2. [blank_start]Prehibridación[blank_end], 3. [blank_start]Hibridación[blank_end], 4.[blank_start]Lavado de Posthibridación[blank_end] y 5. [blank_start]Detección del híbrido[blank_end].
Antworten
  • La aplicación de la membrana
  • Prehibridación
  • Hibridación
  • Lavado de Posthibridación
  • Detección del híbrido

Frage 14

Frage
En el Dot Blot, en la fase de aplicación de la muestra al soporte. No hace falta que humedecemos la membrana que actua de soporte.
Antworten
  • True
  • False

Frage 15

Frage
En el Dot Blot, en la fase de aplicación de la muestra al soporte. Humedecemos la membrana mediante inmersión durante 10 minutos en:
Antworten
  • Un tampón adecuado
  • Agua destilada
  • Nitrocelulosa
  • Nitrogeno

Frage 16

Frage
En el [blank_start]Dot Blot[blank_end], en la fase de Aplicación de la muestra al soporte, cuando ya hemos humectado la membrana, se retira el exceso de este colocando la membrana [blank_start]entre dos hojas de papel de fieltro[blank_end].
Antworten
  • entre dos hojas de papel de fieltro
  • a la junta selladora
  • en la placa colectora de vacio
  • Dot Blot
  • Southern Blot
  • Microarreys
  • NorthenBlot

Frage 17

Frage
En el Dot Blot, el sistema de vacío, consta de [blank_start]una plantilla con pocillos[blank_end] numerados para realizar y poder localizar las aplicaciones, debajo de la cual se sitúa la [blank_start]membrana de nitrocelulosa o nailon[blank_end] humedecida y una [blank_start]junta selladora[blank_end] para evitar la contaminación cruzada entre muestras. Este conjunto se sitúa sobre una [blank_start]cámara colectora[blank_end] que va conectada a [blank_start]vacío[blank_end].
Antworten
  • una plantilla con pocillos
  • membrana de nitrocelulosa o nailon
  • junta selladora
  • camara colectora
  • vacío
  • membrana de nitrocelulosa o nailon
  • una plantilla con pocillos
  • junta selladora
  • cámara colectora
  • vacío
  • junta selladora
  • una plantilla con pocillos
  • membrana de nitrocelulosa o nailon
  • cámara colectora
  • vacío
  • cámara colectora
  • una plantilla con pocillos
  • membrana de nitrocelulosa o nailon
  • junta selladora
  • vacío
  • vacío
  • una plantilla con pocillos
  • membrana de nitrocelulosa o nailon
  • junta selladora
  • cámara colectora

Frage 18

Frage
En el Dot Blot, el proceso de aplicación de la muestra varía para ADN y ARN
Antworten
  • True
  • False

Frage 19

Frage
Introduce los nombres
Antworten
  • Plantilla para las muestras
  • Membrana
  • Junta selladora
  • Soporte de la junta
  • Placa colectora de vacío
  • Tubo y valvula
  • Aire
  • Vacío
  • Membrana
  • Plantilla para las muestras
  • Junta selladora
  • Soporte de la junta
  • Placa colectora de vacío
  • Tubo y valvula
  • Aire
  • Vacío
  • Plantilla para las muestras
  • Membrana
  • Junta Selladora
  • Soporte de la junta
  • Placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio
  • plantilla para las muestras
  • membrana
  • junta selladora
  • soporte de la junta
  • placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio
  • plantilla para las muestras
  • membrana
  • junta selladora
  • soporte de la junta
  • placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio
  • plantilla para las muestras
  • membrana
  • junta selladora
  • soporte de la junta
  • placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio
  • plantilla para las muestras
  • membrana
  • junta selladora
  • soporte de la junta
  • placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio
  • plantilla para las muestras
  • membrana
  • junta selladora
  • soporte de la junta
  • placa colectora de vacio
  • tubo y valvula
  • aire
  • vacio

Frage 20

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. Las muestras de ADN, deben ser desnaturalixadas antes de su aplicación a la membrana. Para ello, las muestras con que se incuban? Durante 100ºC a 10 minutos.
Antworten
  • Hidróxido sódico (NaOH9 a una concentración final de 0,4 M.
  • EDTA, a una concentración final de 10mM
  • Cloruro de Sodio, a una concentración final de 20 M
  • Formol, a concentración 0,5 M

Frage 21

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. Las muestras desnaturalizadas, se tienen que naturalizar con un volumen igual de acetato de amonio 2M a pH 7,0.
Antworten
  • True
  • False

Frage 22

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. Una vez [blank_start]naturalizadas[blank_end], se cargan en las posiciones correspondientes de la [blank_start]plantilla[blank_end] y se aplica el [blank_start]vacío[blank_end]. El [blank_start]ADN[blank_end] de la muestra queda retenido en la [blank_start]membrana[blank_end], mientras que todos los [blank_start]reactivos[blank_end] se filtran a la [blank_start]cámara colectora[blank_end].
Antworten
  • plantilla
  • vacío
  • membrana
  • reactivos
  • ADN
  • cámara colectora
  • naturalizadas

Frage 23

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. Despues de la naturalización cada muestra puede ser lavada, cargando en el correspondiente pocillo: ? y filtrándolo al vacío.
Antworten
  • hidróxido sódico 0,4 M
  • SSC 2x
  • Cloruro de sodio
  • EDTA

Frage 24

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. Terminando el proceso, se desmonta el [blank_start]sistema de vacío[blank_end], se lava la membrana con SSC2x y se seca en estufa a [blank_start]80ºC[blank_end] durante [blank_start]30-120[blank_end] minutos para unir permanntamente el [blank_start]ADN[blank_end] a la membrana. Alternativamente, las muestras dispuestas sobre [blank_start]membranas de nailon[blank_end] pueden ser ancladas definitivamente a estas mediante irradiación con [blank_start]luz ultravioleta[blank_end].
Antworten
  • sistema de vacío
  • 80ºC
  • 30-120
  • ADN
  • membranas de nailon
  • luz ultravioleta

Frage 25

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. En ARN, tambén tenemos que desnaturalizar la muestra, para evitar la formación de horquillas intractenarias que dificultarian la hibridación. En este caso el tratamiento es mas suave, cual es?
Antworten
  • NaOH 10mM
  • EDTA 1mM
  • NaOH 0,4 M
  • EDTA 10mM

Frage 26

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. El lavado se realiza con la misma solución tanto si es ADN como ARN.
Antworten
  • True
  • False

Frage 27

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. En la aplicación de [blank_start]ARN[blank_end]. Una vez extraida la membrana del sistema de vacío, se lava con SSC 2x, 0,1 % de SDS. Las membranas de nitrocelulosa se secan a [blank_start]80ºC[blank_end] y las de nailon se secan en la [blank_start]estufa[blank_end] o se irradian con [blank_start]luz ultravioleta[blank_end].
Antworten
  • ARN
  • 80ºC
  • estufa
  • luz ultravioleta

Frage 28

Frage
En la aplicación de la muestra, en el Dot Blot. En el ADN, las muestras se incuban con [blank_start]hidroxido sodico (NaOH)[blank_end] a concentración [blank_start]0,4M[blank_end] y [blank_start]EDTA[blank_end] a una concentración final de [blank_start]10 mM[blank_end]. En cambio en las de ARN, las muestras se incuban con un tratamiento mas suave hidroxido sodico (NaOH) a concentración [blank_start]10mM[blank_end] y EDTA a una concentración final de [blank_start]1 mM[blank_end].
Antworten
  • hidroxido sodico (NaOH)
  • EDTA
  • 0,4M
  • 10mM
  • 1mM
  • EDTA
  • hidroxido sodico (NaOH)
  • 10 mM
  • 0,4 M
  • 1mM
  • 10mM
  • 0,4M
  • 1mM
  • 1 mM
  • 10mM
  • 0,4mM

Frage 29

Frage
En el Dot Blot, en la fase de Prehibridación. Las membranas con las muestras se incuban con una solución de prehibridación para bloquear las posibles uniones inespecificas de la sonda a la membrana. De manera que al añadir la sona esta solo se pueda unir de manera específica a la secuencia diana.
Antworten
  • True
  • False
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