Importancia de la Amilasa en la germinación

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• ACCIÓN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDÓN

• En cada frasco colocar algodón mojado en el fondo. Colocar 3 ó 4 frijoles o alubias lavados distribuyéndolos de modo que su ombligo (mancha central) quede orientado hacia la pared del frasco.

• Con el papel manila envolver los frascos cerrados sin estar apretados, escribiéndole los siguientes datos:materia, semestre y grupo al que pertenecen, sección de laboratorio, nombre del responsable del equipo, contenido, y fechas en que se inicia y termina la incubación (incluyendo hora).

• Se incuban los frascos de 3 a 4 días en la estufa de incubación cuidando que la temperatura sea de 25-30 0 C

• Para realizar la práctica deberá contar con tres cajas petri numeradas.

• Se eligen 8 semillas y se les elimina el embrión y la raicilla con la navaja o bisturí y además se abren a lo largo colocando hacia arriba su ombligo, obteniéndose así 16 mitades. De preferencia la cascara se quita 

• A 8 mitades (mitades A) se les cortaran las orillas colocándolas con la parte plana hacia abajo de modo que su forma ya no sea elíptica sino rectangular.

• Las otras 8 mitades (mitades B) serán sometidas a un corte muy delgado de la cara plana para eliminar los pequeños bordes naturales. A todas las mitades se les pica con el alfiler en tres partes de manera perpendicular a la cara plana.

• Dividir las placas de Petri en cuadrantes usando un lápiz graso por la parte exterior.

• Colocar dos mitades A con la cara plana hacia abajo, y se presionan ligeramente para marcar el agar, se retira y a continuación con la navaja se corta el agar para hacer un hueco sobre la forma que dejó impresa la semilla y luego se coloca la mitad, de modo que por lo menos dos de sus costados toquen el agar. También en cada placa se colocan dos mitades B con la cara plana hacia abajo y se presionan ligeramente para fijarlas cuidando de no romper el agar.

• Colocar una pequeña gota de agua por un costado de cada mitad. Se mojarán las semillas máximo cada 20 minutos o menos, controlando que no se sequen las zonas de contacto. Las placas se incuban a 25 ó 30 °C 

• Después de transcurrido el tiempo de incubación, se revelan: A cada placa se agrega gota a gota el lugol necesario para cubrir ligeramente toda la placa y se deja actuar por 2 minutos. Después, se elimina el revelador por vertido y se enjuaga la placa con agua de la llave cuidando de que no se desprenda el agar de la placa. Se miden las zonas translúcidas con la regla.