Staphylococcus aureus

Flowchart nodes

• Staphylococcus aureus

• Medios y reactivos

• - Medio Baird-Parker- Tripticasa (tríptico) de agar de soja (TSA) - De infusión de cerebro y corazón (BHI) - plasma coagulasa (conejo) con EDTA - Toluidina azul agar-ADN  - Triptona, extracto de levadura de agar -Prueba de la catalasa

• Equipos y materiales

• - Equipamiento básico mismos que para recuento en placa convencional.- Armario de secado o incubadora de superficie de secado de las placas de agar.- Estériles varillas dobladas que rayan el vidrio, palo de hockey o en forma de azada, con extremos pulida al fuego, de 3-4 mm de diámetro, de 15-20 cm de largo, con una superficie de dispersión de ángulo de 45-55 mm de largo

• PROCEDIMIENTO

• Para cada dilución a ser plateado, la transferencia asépticamente 1 ml de muestra en suspensión de 3 placas de agar Baird-Parker, distribuir 1 ml de inóculo de manera equitativa a 3 placas

• Difundir el inóculo sobre la superficie de la placa de agar, utilizando varilla de vidrio doblado rayas estéril.

• Conservar las placas en posición vertical hasta que el inóculo es absorbido por el agar (unos 10 minutos en placas adecuadamente secas)

• Si inóculo no se adsorbe fácilmente, placas en posición vertical en lugar incubadora durante aproximadamente 1 h. Invertir las placas e incubar 45-48 horas a 35-37 ° C.

• Seleccione placas que contienen 20-200 colonias, a no ser que sólo las placas en diluciones inferiores (> 200 colonias) tienen colonias con aspecto típico de S . aureus . 

• Contar y colonias de registro.

• Seleccionar> 1 colonia de cada tipo se contaron y se prueba para la producción de coagulasa

•  Añadir número de colonias en placas por triplicado representados por las colonias que dan prueba de coagulasa positiva y se multiplican por el factor de dilución de la muestra.

• METODOS

• Prueba de coagulasa

• 1- Transferir sospechoso S . aureus colonias en tubos pequeños que contienen caldo BHI 0,2 a 0,3 ml y emulsionar a fondo. Inocular agar inclinado de medio adecuado de mantenimiento, por ejemplo, la TSA, con asa de siembra de suspensión BHI. Incubar suspensión de cultivo BHI y tubos inclinados de 18-24 horas a 35-37 ° C. 2- Añadir 0,5 ml de plasma reconstituido coagulasa con EDTA,  Incubar a 35-37 ° C y comprobar periódicamente durante 6 h periodo de formación del coágulo. Sólo coágulo firme y completa que se mantiene en su lugar cuando el tubo está inclinada o invertida se considera positiva paraS . aureus .3- Teñir todas las culturas sospechosos con el reactivo de Gram y observar al microscopio.

• Prueba de la catalasa.

• Utilizar el crecimiento de TSA inclinación para la prueba de catalasa en portaobjetos de vidrio o una placa de comer, e iluminar adecuadamente para observar la producción de burbujas de gas.

• Número Más Probable para Staphylococcus spp

• Se recomienda el método del número más probable (NMP) para la vigilancia rutinaria de productos en los que un pequeño número de S . aureus se espera y en los alimentos previstos para contener una gran población de especies competidoras.

• BLIBLIOGRAFIA

• AOAC International. 1995. Métodos Oficiales de Análisis, 16ª ed., Sec. 975.55. AOAC International, Arlington, VA Bennett, RW, M. Yeterian, W. Smith, CM Coles, M. Sassaman, y FD McClure. 1986. Staphylococcus aureus características de identificación y enterotoxigenicidad. J. Sci Food. 51 : 1337-1339. - Sperber, WH, y SR Tatini. 1975. Interpretación de la prueba de coagulasa en tubo para la identificación de Staphylococcus aureus . Appl. Microbiol. 29 : 502-505. - ( RECUPERADO DE: http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm071429.htm )

• INTEGRANTES

• Robles Prieto Jessica Esmeralda  Chávez Preciado Maria del Rosario