El proceso de Reacción en Cadena de la Polimerasa

Flowchart nodes

• INICIO El proceso de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

• ADN DIANA+NUCLEOTIDOS+TAQ POLIMERASA+CEBADORES+SOLUCION BUFFER+AGUA MINERAL, TODO EN UN TUBO DE ENSAYO

• DESNATURALLIZACION DEL ADN

• SE ELEVA LA TEMPERATURA A 95°C

• SE SEPARA LA DOBLE HELICE DEL ADN EN CADENAS SENCILLAS

• TEMPLAR CEBADORES

• SE BAJA LA TEMPERATURA ENTRE 50-60°C

• SE UNEN LOS CEBADORES O PRIMERS A SECUENCIAS COMPLEMENTARIAS, SITUADAS EN LOS EXTREMOS 3´DEL ADN DIANA

• EXTENSIÓN DE CEBADORES O PRIMERS

• SE ELEVA LA TEMPERATURA A 72°C 

• LA TAQ POLIMERASA SINTETIZA LA CADENA COMPLEMENTARIA A PARTIR DEL PRIMERS, EN EL PRIMER CICLO SOBRE PASA LOS LIMITES DE LA SECUENCIA DIANA

• SE REPITE EL CICLO, PARA OBTENER EL NUMERO DE MOLECULAS DE ADN POR DUPLICADO

• COMO TODO ESTÁ EN EL TUBO DE ENSAYO, REINICIAMOS EL CICLO TANTAS VECES COMO SEA POSIBLE: CALENTAMOS, SE SEPARAN LAS CADENAS, ENFRIAMOS, SE ADHIEREN LOS CEBADORES, CALENTAMOS NUEVAMENTE, PARA QUE LA POLIMERASA ACTUE, SE OBTIENEN 2 CADENAS, LUEGO 3 Y ASÍ SUCESIVAMENTE

• FIN