Promotores y terminador transcripcional

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Oscar Antonio Alfonso Villegas
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Oscar Antonio Alfonso Villegas
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Promotores y terminador transcripcional
  1. Promotores Inducibles
    1. 1. Promotor lacZ. El IPTG es un análogo de Lactosa y se usa para regular la expresión de genes recombinante, (Isopropyl-B-Thiogalactoside ITPG)
      1. 2. Promotor de fago T7. Bacterias modificadas para portar el gen de RNA Pol del fago T7 bajo el control del promotor lac.
      2. Complementación alfa
        1. b-Galactosidasa (gen lacZ), es un homotetrámero. Cada subunidad tiene dominio N terminal (péptido alfa) y C terminal (péptido omega)
          1. Homotetrámero
            1. Estructuras cuaternarias
        2. Terminador transcripcional
          1. Partes genéticas al final de un gen u operón que hacen que la transcripción se detenga
            1. 1.- Terminadores rho-independientes. secuencias palindromicas con loops integrados por G-C
              1. 2.- terminadores rho-dependientes. Rho es una helicasa
            2. Genes Reporteros
              1. Las proteínas de fusión o proteínas quiméricas formadas a partir de la traducción de dos o más genes previamente independientes.
                1. A) Proteínas fluorecentes como reporteros. = Son evidencia directa de transcripción y traducción
                  1. A través de la sustitución de aminoácidos en proteínas ya conocidas (GFP y RFP) se han mejorado características como el brillo o la estabilidad y modificado su espectro de emisión
                  2. B) Genes reporteros no fluorecentes
                    1. Ejemplos: Gen de la luciferasa (Lux), gen Cloranfenicol acetil transferasa (CAT), gen de la β-Galactosidasa (β-Gal) y gen de la β-glucoronidasa (GUS)
                    2. Etiquetas de afinidad
                      1. Péptido o proteína que se une a un ligando pequeño (Ej. Iones metálicos), el cual se halla ligado a un soporte sólido. O bien se unen a una proteína inmovilizada (Ej. Anticuerpo)
                        1. Ejemplos de etiquetas de afinidad
                          1. Consideraciones sobre el efecto de tags sobre las proteinas de interes :
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