16624596
Description
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Created by gaby tituaña
almost 6 years ago
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Tinción Eosina &
Hematoxilina
- Generalidades sobre colorantes
Tinción manual y automatizada
Tiempos
- La tinción de hematoxilina eosina se conoce desde la segunda mitad del siglo XIX.
- Protocolo: Una de las ventajas de esta tinción es que
resulta fácil de llevar a cabo y requiere poca
instrumentación. Primeramente si la muestra está
incluida en parafina debe hidratarse. Usualmente se
emplea la parafina para incluir la muestra de forma que
puedan realizarse cortes de microtomía, obteniéndose
cortes muy finos.
- Protocolo: Una de las ventajas de esta tinción es que
resulta fácil de llevar a cabo y requiere poca
instrumentación. Primeramente si la muestra está
incluida en parafina debe hidratarse. Usualmente se
emplea la parafina para incluir la muestra de forma que
puedan realizarse cortes de microtomía, obteniéndose
cortes muy finos.
- Hematoxilina: este compuesto se extrae de Haematoxylum
campechianum, una planta leguminosa originaria de la península
de Yucatán, Méjico. Como curiosidad, el nombre de esta planta
significa madera que sangra. De la planta se obtiene una sustancia
que al oxidarse adquiere un color morado. Para aumentar su
capacidad colorante se combina con iones metálicos de hierro o
aluminio, consiguiéndose así la hematoxilina. La hematoxilina se
une intensamente a las cargas negativas (aniones), como los
ácidos. Es por esto que se une fuertemente al ADN (ácido
desoxirribonucleico). La tinción con hematoxilina tiñe de color azul
los núcleos.
- Procedimiento Partimos de muestras que han sido
fijadas e incluidas en parafina. Estas muestras se
han cortado en secciones de unas 8 µm de grosor
y adheridas a portaobjetos recubiertos con
gelatina-alumbre. 1.- 2x10 min en xileno para
desparafinar 2.- 2x10 min en etanol 100º 3.- 10 min
en etanol 96º 4.- 10 min en etanol 80º 5.- 10 min en
etanol 50º 6.- 5 min en H2O destilada 7.- 5-10 min
en Hematoxilina de Mayer La hematoxilina no es
un colorante en sentido estricto sino que es la
hemateína, su producto oxidado, la que teñirá
sustancias como la cromatina del núcleo y las
grandes agregaciones ribosomales del citoplasma,
como las que se dan en el retículo endoplasmático
rugoso.
- 8.- 15 min en agua corriente. Diferenciación. 9.- 2x1 min en H2O
destilada 10.- 0.5 a 2 min en Eosina al 0.2 % en H2O La eosina,
colorante ácido, se une a elementos del citoplasma y de la matriz
extracelular. Se pueden usar tres tipos de eosina: eosina
amarillenta (CI 45380), eosina azulada (CI 45400) y eosina soluble
en alcohol (CI 45386). La primera es la más usada. 11.- Tiempo
variable (unos cuantos segundos) en 70º para diferenciación El
tiempo de diferenciación depende de la intensidad de tinción de
eosina que queramos en nuestra muestra. Se le pueden añadir
unas gotas de acético. 12.- 20s en etanol 96º 13.- 2x3 min en
etanol 100º 14.- 2x10 min en xileno
- 8.- 15 min en agua corriente. Diferenciación. 9.- 2x1 min en H2O
destilada 10.- 0.5 a 2 min en Eosina al 0.2 % en H2O La eosina,
colorante ácido, se une a elementos del citoplasma y de la matriz
extracelular. Se pueden usar tres tipos de eosina: eosina
amarillenta (CI 45380), eosina azulada (CI 45400) y eosina soluble
en alcohol (CI 45386). La primera es la más usada. 11.- Tiempo
variable (unos cuantos segundos) en 70º para diferenciación El
tiempo de diferenciación depende de la intensidad de tinción de
eosina que queramos en nuestra muestra. Se le pueden añadir
unas gotas de acético. 12.- 20s en etanol 96º 13.- 2x3 min en
etanol 100º 14.- 2x10 min en xileno
- La tinción de hematoxilina eosina se conoce desde la segunda mitad del siglo XIX.
- Tinciones Especiales
(histoquímica) Técnicas y
Fundamentos
- Tinciones Especiales De los cientos de tinciones
especiales que figuran en los textos clásicos de técnica
microscópica, el patólogo quirúrgico encuentra unas
pocas realmente útiles hoy en día. Especialmente desde
la generalización del uso de la inmunohistoquímica. Las
más usadas son las siguientes: PAS (periodicacid-Shiff)
Tinciones para microorganismos Tinciones argentafines
y argirófilas Tinción de amiloide Tinción de reticulina
Tinciones tricrómicas Tinciones para hemosiderina
(Perls) Tinciones para calcio (vonKossa) Tinción de
Giemsa Fibras elásticas
- Tinciones Especiales De los cientos de tinciones
especiales que figuran en los textos clásicos de técnica
microscópica, el patólogo quirúrgico encuentra unas
pocas realmente útiles hoy en día. Especialmente desde
la generalización del uso de la inmunohistoquímica. Las
más usadas son las siguientes: PAS (periodicacid-Shiff)
Tinciones para microorganismos Tinciones argentafines
y argirófilas Tinción de amiloide Tinción de reticulina
Tinciones tricrómicas Tinciones para hemosiderina
(Perls) Tinciones para calcio (vonKossa) Tinción de
Giemsa Fibras elásticas
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