Biopsia quirúrgica por congelación
Criostato, Generalidades, Proceso y tinción
La biopsia por congelación es una importante herramienta de la patología que consiste en emitir un
diagnóstico histopatológico en tejido fresco congelado en el menor tiempo posible. No obstante, el
desconocimiento de esta técnica implica gastos excesivos en el sistema de salud, una mayor
morbimortalidad en los pacientes, conductas terapéuticas innecesarias, una mayor tasa de recidiva
tumoral y resultados estéticos desfavorables.
Criostato
Generalidades
Un criostato (microtomo introducido en una camara frigorifica especial, donde la congelación se
produce mediante el enfriamiento de la camara y la platina por la forzada circulación de gas freon). Una
temperatura excesivamente baja produce un endurecimiento excesivo de la pieza, y la cuchilla bota
sobre ella sin cortar, la temperatura se aumenta pasando el dedo sobre la pieza. En el criostato, gracias
al antiroll, el corte queda extendido sobre la cuchilla y se extrae colocando el portaobjetos sobre la
cuchilla, sin tocarla. El corte se adhiere al porta por efecto de la diferencia de temperaturas. Una vez
colocados los cortes sobre el porta, se puede proceder a la tinción.
Proceso Y
tinción
Los cortes obtenidos se capturan en una lámina cubreobjetos y posteriormente se colorean. El
colorante puede ser azul de metileno, azul de toluideno o la tradicional coloración de hematoxilina
eosina.
1. Ingreso de la muestra en fresco. 2. La muestra es observada por el patólogo, quien realiza los
cortes correspondientes. 3. Toma de las improntas en fresco sobre láminas portaobjetos. 4. Se coloca
el corte deseado por el patólogo sobre resina de congelación y se lleva al criostato, donde se congela
a -30º C durante 3 minutos. 5. Posteriormente se realiza el corte del espécimen en micrótomo en frío
con espesores de 5 a 6 micras. 6. Montaje y coloración del tejido.
Es el procedimiento solicitado durante alguna intervención quirúrgica que se realiza con estudio
citológico y cortes por congelado del tejido enviado para realizar un diagnóstico histopatológico
que defina la conducta quirúrgica
Impronta, Generalidades, Proceso y tinción
El conjunto de manipulaciones y métodos que tienen por objeto la confección de preparaciones
histológicas recibe el nombre de procesamiento histológico de los tejidos y comprende los pasos de
fijación, inclusión, corte y coloración. Una preparación histológica es un fragmento de tejido de muy
escaso espesor que está dispuesto para su observación microscópica, que se secciona de un bloque o
masa de tejido incluido en un medio de homogenización (parafina) y que se fija a una superficie plana
(portaobjetos) por un pegamento especial (bálsamo). La extensión citológica es un conjunto de
células independientes procedentes de un tejido y extendidas sobre un portaobjetos en forma de
capa unicelular que permite su observación microscópica. Cuando el material corresponde a sangre,
la extensión también recibe el nombre de frotis. La impronta es un tipo de preparación que se realiza
en órganos donde las células tienen escasos nexos de unión entre sí y con las restantes estructuras
tisulares
Existen diferentes técnicas para la realización de las improntas, dentro de las que se encuentran las
siguientes
Por contacto: recomendada en ganglios linfáticos y biopsias con aguja de tru-cut. Es útil en la mayor
parte de los tumores de consistencia blanda; la muestra se obtiene por aposición de la superficie del
tejido contra el portaobjeto, o rodándolo sobre la laminilla en los especímenes pequeños
Por aplastamiento entre dos portaobjetos: técnica muy útil para fragmentos de tejido pequeño y
blando, como el proveniente de tumores cerebrales
Raspado de la superficie de corte del espécimen: se emplea el borde de un portaobjeto u hoja de
bisturí y se extiende el material colectado. Es el método más utilizado, puede realizarse en todos los
tumores y es el de elección para tejidos firmes o duros (carcinomas mamarios escirrosos, tejido
óseo, etcétera).
Para la tinción de las muestras puede recurrirse a la hematoxilina-eosina y a las tinciones de
Papanicolaou y de DiffQuick. La mejor alternativa será aquella con la que el patólogo esté más
habituado. Algunas consideraciones respecto a cada tinción:
Tinción rápida con hematoxilina-eosina: es la más popular, es útil en la mayoría de las ocasiones y
permite la comparación de las características de las improntas con los cortes por congelación y las
muestras definitivas. Esta técnica es la preferida por la mayor parte de los patólogos quirúrgicos, por
su familiaridad con ella.
Técnica rápida de Papanicolaou: es una buena alternativa ya que la mayoría de los patólogos la usa en
su práctica citológica. Es excelente para evaluar las características nucleares, pero consume más
tiempo que la hematoxilinaeosina.
Diff-Quick: consume menos de un minuto y está recomendada para lesiones linfoides,
hematopoyéticas, con fondo hemorrágico, en sospecha de procesos infecciosos y en lesiones
testiculares y de glándulas salivales.
Muestras insuficientes e
inapropiadas
Ausencia de datos clinicos no concluyentes, pero compatibles
Muestras insuficientes: El tamaño del especímen debe contener suficiente tejido con grupos celulares
Muestra inapropiada: No representativa, constituye la lesión propiamente dicha como la
necrosis
Inadecuada:Tejido distorcionado por fracción o aplastamiento o por coagulacion
Mal conservada; tejido autolisado por falta de preservación inadecuada o insuficiente