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Description
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Created by anamupa2_96
almost 10 years ago
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MORFOLOGÍA DE BACTERIAS
EN CULTIVO
- 1. CULTIVO DE LOS MICROORGANISMOS
- Medios de Cultivo
- Son una mezcla equilibrada de
nutrientes que en concentraciones
adecuadas y con condiciones físicas
óptimas permiten un buen
crecimiento de los microorganismos
- Contienen una base
mineral; fuente de carbono,
nitrógeno y azufre;
atmósfera adecuada y los
factores de crecimiento
necesarios.
- Hay que tener en cuenta los
nutrientes, el pH, la necesidad
de gases, el suministro de luz y
un control de temperatura.
- tipos de medios
de cultivos
- Líquido o caldos
- composición: Sintéticos
(Composición química
definida)
- composición: Sintéticos
(Composición química
definida)
- Sólido (posee agente
solidificante (agar) a una
concentración del 1,5%)
- composición:
Complejo
(Composición química
no definida)
- composición:
Complejo
(Composición química
no definida)
- Semisólido (Concentración
de agar inferior al 0.2%)
- Enriquecimiento
- medio que tiene un gran
exceso de nutrientes y se
utiliza para
microorganismos que
tienen grandes exigencias
nutricionales.
- medio que tiene un gran
exceso de nutrientes y se
utiliza para
microorganismos que
tienen grandes exigencias
nutricionales.
- Selectivo o
inhibitorios
- medio que sólo
permite el
crecimiento de un
grupo de
microorganismos e
inhibe el de otros
- medio que sólo
permite el
crecimiento de un
grupo de
microorganismos e
inhibe el de otros
- Diferenciales
- medio que permite revelar
características fisiológicas
de los microorganismos.
Levine (permite visualizar la
fermentación de lactosa por
viraje de un indicador
ácido-base
- medio que permite revelar
características fisiológicas
de los microorganismos.
Levine (permite visualizar la
fermentación de lactosa por
viraje de un indicador
ácido-base
- Enriquecimiento
- Líquido o caldos
- Preparación de
medios de Cultivo
- los medios de cultivo se
preparan a partir de
medios comerciales
deshidratados
- • Medios líquidos
- Disolver los ingredientes del medio en el
volumen requerido de agua destilada,
agitando el recipiente con una varilla de vidrio
o agitador magnético.
- Es necesario medir el pH y en caso
necesario ajustarlo con soluciones de NaOH
y HCl. Tapar con algodón y papel aluminio
el recipiente. Posteriormente esterilizar a
121°C durante 15 minutos en autoclave, si
los componentes del mismo no son
termolábiles.
- Leer la composición química del medio
de cultivo a preparar y pesar la
cantidad necesaria de cada
componente, según el volumen de
medio a preparar.
- Nota: los medios líquidos pueden
repartirse en tubos de ensayo (5 mL en
cada uno) o fraccionarlos en matraces,
frascos, botellas, que puedan
esterilizarse
- Disolver los ingredientes del medio en el
volumen requerido de agua destilada,
agitando el recipiente con una varilla de vidrio
o agitador magnético.
- • Medios
sólidos
- Los medios líquidos se convierten
en sólidos al agregarle un
solidificante
- En general se usa el agar-agar.
- La cantidad de agar (en general 2%) se
mezcla en un volumen pequeño de agua y
se incorpora al medio líquido. Si éste no
debe subdividirse, el matraz se lleva al
autoclave, donde el agar funde. Si se debe
repartir en tubos, la mezcla de agar-medio
debe calentarse en Baño María para
homogenizarlo.
- El agar funde a 100°C y se solidifica
debajo de 45-50°C. Si se va servir el
medio en cajas de Petri, los medios
sólidos en matraces deben fundirse
previamente, para adicionar entre 15 a
20 mL. de medio sobrefundido,
evitando formar burbujas.
- Si el medio está envasado en
tubos y desea que al solidificar
quede inclinado, al salir del
autoclave se los deja solidificar en
un ángulo de 20 o 30° sobre una
varilla de vidrio (agar inclinado o
en pico de flauta)
- Los medios líquidos se convierten
en sólidos al agregarle un
solidificante
- los medios de cultivo se
preparan a partir de
medios comerciales
deshidratados
- Son una mezcla equilibrada de
nutrientes que en concentraciones
adecuadas y con condiciones físicas
óptimas permiten un buen
crecimiento de los microorganismos
- Esterilización
- Se define como el proceso por el cual se
eliminan todos los microorganismos
incluidas las endosporas bacterianas de
cualquier objeto, superficie o medio, por
remoción o muerte de éstos
- nos permite asegurar que se trabajará
exclusivamente con los
microorganismos deseados.
- técnicas de esterilización
- Métodos Físicos
- Métodos Químicos
- Métodos Biológicos
- Métodos Físicos
- Se define como el proceso por el cual se
eliminan todos los microorganismos
incluidas las endosporas bacterianas de
cualquier objeto, superficie o medio, por
remoción o muerte de éstos
- Medios de Cultivo
- 2. SIEMBRA Y AISLAMIENTO
- El paso de una muestra microbiana a
un medio de cultivo se denomina
siembra o inoculación y el paso de una
muestra de un medio de cultivo a otro
se denomina resiembra. Toda siembra
o incluso resiembra, se puede realizar
de diferentes formas de acuerdo al fin
que se persiga
- Luego de sembrado, el medio de cultivo
se incuba a una temperatura adecuada
para el crecimiento.
- Siembra en medio líquido:
- Se puede realizar con asa de
siembra, pipeta o hisopo.
Generalmente se realiza en tubos
o en matraces.
- Se puede realizar con asa de
siembra, pipeta o hisopo.
Generalmente se realiza en tubos
o en matraces.
- Siembra en medio sólido
- Puede ser en tubos o
cajas de Petri
- a) Siembra del
inóculo en placa
- Técnica de Barry
- •Siembra de muestra
líquida en placa con asa
de Digrasky
- Siembra por agotamiento o
aislamiento en estría
- Siembra por agotamiento o
aislamiento en estría múltiple
- Técnica de los cuatro cuadrantes
- Técnica de los tres giros
- Técnica de siembra por dilución
- Técnica de Barry
- b) Siembra del inóculo en tubo
- Siembra por estría en tubos con
medio sólido inclinado (o pico de
flauta)
- Siembra por picadura
- Siembra por picadura y estría
- Siembra en tubos con medios semisólidos
- Siembra por estría en tubos con
medio sólido inclinado (o pico de
flauta)
- Puede ser en tubos o
cajas de Petri
- Siembra en medio líquido:
- Luego de sembrado, el medio de cultivo
se incuba a una temperatura adecuada
para el crecimiento.
- El aislamiento consiste en
obtener un solo tipo de
microorganismo a partir de una
población mixta. En la naturaleza,
los microorganismos se
encuentran asociados, por lo que
se recurre a la técnica de
aislamiento para separarlos.
- Aislamiento de
bacterias anaerobias
- Para aislar microorganismos anaerobios que
son rápidamente destruidos por exposición al
oxígeno, las placas pueden ser preparadas en la
forma usual, y luego de sembradas, incubadas
en recipientes cerrados en atmósfera sin
oxígeno
- Para aislar microorganismos anaerobios que
son rápidamente destruidos por exposición al
oxígeno, las placas pueden ser preparadas en la
forma usual, y luego de sembradas, incubadas
en recipientes cerrados en atmósfera sin
oxígeno
- Aislamiento de
bacterias anaerobias
- El paso de una muestra microbiana a
un medio de cultivo se denomina
siembra o inoculación y el paso de una
muestra de un medio de cultivo a otro
se denomina resiembra. Toda siembra
o incluso resiembra, se puede realizar
de diferentes formas de acuerdo al fin
que se persiga
- 3. IDENTIFICACIÓN
- Caracterización de las colonias
formadas en medios de cultivo sólidos
- Tamaño
- Color
- Forma
- Borde
- Elevación
- Luz reflejada
- Luz transmitida
- Consistencia
- Superficie
- Producción de pigmento
- Aspecto
- Tamaño
- Examen microscópico de células vivas
y de frotis teñido por coloración de
Gram
- COCOS
- BACILOS
- ESPIRALES
- COCOS
- Desarrollo de pruebas
bioquímicas primarias y
secundarias
- Con la aplicación y
desarrollo de estas
pruebas de determina
el género y la especie
del microorganismo
en estudio
- Con la aplicación y
desarrollo de estas
pruebas de determina
el género y la especie
del microorganismo
en estudio
- Caracterización de las colonias
formadas en medios de cultivo sólidos
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