4556198
Description
Mind Map by Erdinc Albayrak, updated more than 1 year ago
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Created by Erdinc Albayrak
almost 9 years ago
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RFLP- Verfahren
- Bedeutung/ Geschichte
- Veranschaulichung der unterschiedlichen Längen von wiederholenden DNA- Abschnitten
- Verfahren von Alec Jeffrey im Jahre 1985 entwickelt
- Verfahren von Alec Jeffrey im Jahre 1985 entwickelt
- Veranschaulichung der unterschiedlichen Längen von wiederholenden DNA- Abschnitten
- Durchführung
- Vorprozedur
- Isolierung DNA
- Erkennung von Bausteinsequenzen, und Ausschneidung aus DNA
- VTNR Abschnitte besitzen bestimmte Basenfolge eingerahmz und dadurch Erkennung "Schneideenzyme"
- VTNR Abschnitte besitzen bestimmte Basenfolge eingerahmz und dadurch Erkennung "Schneideenzyme"
- Erkennung von Bausteinsequenzen, und Ausschneidung aus DNA
- Längenordnung der DNA Fragmente/ Gel- Elektrophrorese
- Agarose- Gel in einem elektrischen Feld pipettiert
- DNA- Stücke wandern zum Pluspol, da Phosphat- Gruppe der DNA = negativ
- Fragmente variieren in Geschwindigkeit und Masse
- Je kürzer + leichter, desto schneller
- Denaturierung
- DNA- Stücke werden durch Erhitzung + Zugabe von Lauge zu Einzelsträngen aufgespalten
- Fixierung
- Stabilität + Positionbewahrung durch "Southern-Blot"
- Enzelstränge auf Nylon- Membran übertragen und durch wärme fixiert
- Hybridisierung
- Bandenmuster durch DNA- Sonde sichtbar gemacht
- DNA- Sonden bestehen aus Enzym oder radioaktiv- makiertem
- Sind komplementär auf Nylon- Membran liegende DNA- Fragmente
- Fragmente leuchten schwach auf
- Fragmente leuchten schwach auf
- Sind komplementär auf Nylon- Membran liegende DNA- Fragmente
- DNA- Sonden bestehen aus Enzym oder radioaktiv- makiertem
- Bandenmuster durch DNA- Sonde sichtbar gemacht
- Hybridisierung
- Enzelstränge auf Nylon- Membran übertragen und durch wärme fixiert
- Stabilität + Positionbewahrung durch "Southern-Blot"
- Fixierung
- DNA- Stücke werden durch Erhitzung + Zugabe von Lauge zu Einzelsträngen aufgespalten
- Denaturierung
- Je kürzer + leichter, desto schneller
- Fragmente variieren in Geschwindigkeit und Masse
- DNA- Stücke wandern zum Pluspol, da Phosphat- Gruppe der DNA = negativ
- Agarose- Gel in einem elektrischen Feld pipettiert
- Isolierung DNA
- Vorprozedur
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