null
US
Iniciar Sesión
Regístrate Gratis
Registro
Hemos detectado que no tienes habilitado Javascript en tu navegador. La naturaleza dinámica de nuestro sitio requiere que Javascript esté habilitado para un funcionamiento adecuado. Por favor lee nuestros
términos y condiciones
para más información.
Siguiente
Copiar y Editar
¡Debes iniciar sesión para completar esta acción!
Regístrate gratis
37615553
P2 Extracción DNA
Descripción
ING. GENÉTICA
Sin etiquetas
dna
química
Diagrama por
Caro Huerta
, actualizado hace más de 1 año
Más
Menos
Creado por
Caro Huerta
hace casi 2 años
0
0
0
Resumen del Recurso
Nodos de los diagramas
Extracción de DNA plasmídico
Lisis alcalina
Hacer cultivo E.Coli 3-5 ml con antibiótico
Dejarlo crecer a 37°C en agitación
Cosechar las células por centrifugación
Descartar el sobrenadante
Lavar paquete celular
1 ml MgSO4 10mM
Centrifugar a 13,000 rpm
Desechar el sobrenadante
3 min a 6000 rpm
Purificación de Plásmido con Sílica
Resuspender la pastilla en S.I (pH7) helada
Dar vortex hasta resuspender el paquete
Agregar la S.II (pH.B) y mezclar
Agregar S.III (pH.A), agitar e incubar 10 min en hielo
Centrifugar 10 min a 13,200 rpm
Recuperar el sobrenadante en un tubo nuevo
+ 450 μl de buffer NaI 6M)
Vortexear, dejar reposar 5 min
Resuspender sílica y agregar 10μl
Centrifugar 1 min a 12,000 rpm.
Descartar el sobrenadante.
Lavar pastilla con 700μl buffer New Wash (4)
Resuspender la pastilla
Repetir 3 veces, Centrifugando 1 min a 12,000rpm
Remover todo el sobrenadante
Dejar secar pastilla 5 min a 37°C
Resuspender la pastilla en 20 μl de Rnasa diluida
Incubar 1h a 37°C
Centrifugar a 13,200 rpm
Recuperar sobrenadante en un tubo eppendorf nuevo
Centrifugar 2 min a 13, 200 rpm
Secar la pastilla por 5 min a 37°C
Extracción de plásmido por Calor-NaClO4
Centrifugar 3 ml de cultivo
Resuspender en 175 μl de sol TES
Agregar 25 μl de lisozima (10 mg/ml)
Mantener 20 min en hielo
Agregar 400 μl de agua helada
Incubar 15 min a 73°C
Centrifugar 15 min a 12000 rpm
Transferir el sobrenadante en un tubo nuevo
Agregar 60 μl de NaClO4 5M
Agregar 600 μl de Isopropanol, mezclar
Centrifugar 15 min a 12000 rpm
Lavar el pellet con 600 μl de etanol al 70 % 2 veces
Secar y resuspender en 30 μl de RNAsa diluida.
Mostrar resumen completo
Ocultar resumen completo
¿Quieres crear tus propios
Diagramas
gratis
con GoConqr?
Más información
.
Similar
CIENCIAS AUXILIARES DE QUÍMICA ORGÁNICA
Luis Carrillo
QUÍMICA, PASAPALABRA...
JL Cadenas
Diferencias entre la Química y Física
maya velasquez
Sistema Internacional de Unidades (SI)
Raúl Fox
Apuntes sobre Modelos Atómicos - Rutherford y Bohr
Raúl Fox
Apuntes sobre Modelos Atómicos - Dalton y Thomson
Raúl Fox
Estructura atómica
Elvy5
CLASIFICACIÓN DE LA QUIMICA
NATALI GUSQUI
Nomenclatura química (Sistemas Stoke y Estequiométrico)
Marcela Fallas
Examen Metabolismo
Diego Santos
Modelos Atómicos
Raúl Fox
Explorar la Librería