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Creado por Rogerio Quintiliano
hace alrededor de 6 años
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Pregunta | Respuesta |
Biotecnologia | 1a Aula |
Como abrir a fita de DNA? | Em condições normais a abertura ocorre pela elicase, no entanto, como é caro para uso laboratorial, apenas aquecer faz a abertura da fita. |
Porque utilizar PRIMER? | O primer é um iniciador para que a DNA polimerase inicie o trabalho. |
Para formar a fita complementar o que fornecer? | Deve-se fornecer nucleotídeos |
O que é a DNA polimerase? | Na biologia molecular, as polimerases de DNA são enzimas que sintetizam moléculas de DNA de desoxirribonucleótidos, os blocos de construção do DNA. Essas enzimas são essenciais para a replicação do DNA e geralmente trabalham em pares para criar duas cadeias de DNA idênticas a partir de uma única molécula de DNA original. Durante este processo, a polimerase de DNA "lê" as vertentes de DNA existentes para criar duas novas vertentes que combinam as existentes. |
taq Polimerase | Taq DNA Polimerase é uma enzima termoestável isolada da bactéria termofílica Thermus aquaticus (vive 72°C) e expressa em bactérias Escherichia coli. Esta enzima recombinante é constituída por uma cadeia polipeptídica com o peso molecular de aproximadamente 94 kDa apresentando as atividades de 5’→3’ DNA polimerase e 5´→3´ exonuclease. Não possui atividade 3'→5' exonuclease (proofreading). Ideal para reações de PCR |
O que são sequências palindromes | são sequências de desoxirribose que se você ler de cinco linhas para três linhas da fita superior ela igual Leno da linha inferior de cinco linhas para três linhas |
1.O que é Biotecnologia? | É a Utilização de agentes biológicos ou partes destes afim de gerar produtos e serviços tendo como base princípios científicos e de engenharia. |
2.Tecnologia do DNA recombinante - Engenharia genética | É o termo usado para descrever algumas técnicas modernas em biologia molecular afim de mudar a constituição genética das células vivas de tal modo que estas possam produzir novas substâncias.Há o melhoramento tradicional (por cruzamentos) mas tem como problema que não se recombina apenas o que quer mas tudo. Na engenharia genética o caracteristica desejado e recombinado de forma mais precisa. |
3.O que é DNA recombinante? | É um DNA hibrido não natural de duas fontes diferentes. |
4.Do que precisa para fazer DNA recombinante? | De inicio duas enzimas, chamadas enzimas de restrição, com função de endonuclases e exonuclease e DNA ligase que forma a ligação de fosfodiéster. Em bactérias serve como proteção contra o DNA invasor. Ela distingue o seu material genético do invasor porque o seu DNA está metilado, função realizada pela enzima metilase. |
5.O que são enzimas de restrição? | As enzimas de restrição ou endonucleases de restrição como também são conhecidas, são enzimas que cortam a molécula de DNA através do reconhecimento de sequências nucleotídicas específicas. |
6.Em condicoes normais, onde agem as enzimas de restrições? | Agem apenas no DNA invasor. |
7.Sitio de restrições | Quebra por hidrolise a ligação fosfodiester e as ligações de H se quebram consequentemente. |
8.Quantos tipos de enzimas de restrições existem? | Existem três tipos. A do tipo 2ª mais importante. Esta reconhece de 4 a 8 pares de bases em sequencias palindrômicas. |
9.Enzimas de restrição tipo I | Possui 3 subunidades. Uma de restrição, metilação e reconhecimento. A seguencia e assimétrica e local de hidrolise não é especifico. Este ocorre sempre em locais diferentes e precisa de ATP. |
10.Enzimas de restrição tipo II | Utiliza duas enzimas, uma de restrição (endonuclease) e uma de metilação. A hidrolise ocorre dentro da sequencia palindrômica, não necessita de ATP e apenas de Mg+. |
11.Enzimas de restrição tipo III | 2 subunidades, uma de restrição e uma de metilação e reconhecimento (MS). A sequencias é assimétrica (5 a 7bp), dupla cadeia de DNA hemimetilada, sendo local de hidrolise 24 a 26 bp de distancia. A hidrolise é sempre em local diferente e necessita de ATP. |
12.Quantos tipos de corte? | Um tem espaço de fita simples (corte coesivo) e outro não (corte cego). O corte coesivo deixa uma fita simples que pedem comparativas. A de corte cego não tem. |
O que é transfecção | é a introdução de DNA em células eucarióticas. Ocorre de duas maneiras. transiente ou temporária OU estável ou permantente. A 1ª nao se integra ao cromossomo. A 2ª se integra ao cromossomo. |
O Vetor pode ser: | Um vírus ou Um plasmídeo |
Diferentes classes de bacteriofagos podem carregar tamanhos diferentes de insertos de dna doador |
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