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Descripción
Mapa Mental por Paola Caviedes, actualizado hace más de 1 año
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Creado por Paola Caviedes
hace más de 6 años
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PCR-REACCIÓN DE
LA CADENA DE
POLIMERASA
- Qué es?
- Es una técnica para hacer
miles de copias de una
determinada región de ADN
- Es una técnica para hacer
miles de copias de una
determinada región de ADN
- Ingredientes de
la PCR
- Enzima polimerasa
- Taq polimerasa, por la bacteria
tolerante al calor de la que se aisló
(Thermus aquaticus). La Taq
polimerasa es ideal para la PCR
gracias a esta estabilidad térmica
- Taq polimerasa, por la bacteria
tolerante al calor de la que se aisló
(Thermus aquaticus). La Taq
polimerasa es ideal para la PCR
gracias a esta estabilidad térmica
- Pimers o Cebadores
- son
- Una corta secuencia de
nucleótidos que
proporciona un punto de
partida para la síntesis de
ADN.
- Una corta secuencia de
nucleótidos que
proporciona un punto de
partida para la síntesis de
ADN.
- son
- ADN molde
- A partir del cual se
quiere amplificar un
fragmento o secuencia
determinada.
Normalmente es el
ADN genómico
- A partir del cual se
quiere amplificar un
fragmento o secuencia
determinada.
Normalmente es el
ADN genómico
- Nucleótidos
- Bloques
básicos del
ADN
- Bloques
básicos del
ADN
- cofactores
- MgCl2: lo necesita la
Taq para actuar
- MgCl2: lo necesita la
Taq para actuar
- Tampón
de la Taq
- En este tampón se
encuentran todos
los reactivos
necesarios para que
la Taq actúe
eficientemente, y
regula el pH de la
reacción.
- En este tampón se
encuentran todos
los reactivos
necesarios para que
la Taq actúe
eficientemente, y
regula el pH de la
reacción.
- Agua destilada y
estéril:
- En ella se van a
diluir todos estos
reactivos que
componen la mezcla
de reacción.
- En ella se van a
diluir todos estos
reactivos que
componen la mezcla
de reacción.
- Enzima polimerasa
- Los pasos de la PCR
- 1. Desnaturalización (96°C): la reacción
se calienta bastante para separar, o
desnaturalizar, las cadenas de ADN.
Esto proporciona los moldes de
cadena sencilla para el siguiente paso.
- 2. Templado (55°C-65°C): la reacción
se enfría para que los cebadores puedan
unirse a sus secuencias complementarias
en el molde de ADN de cadena sencilla.
- 3. Extensión (72°C): la temperatura de la
reacción se eleva para que la Taq
polimerasa extienda los cebadores y
sintetice así nuevas cadenas de ADN.
- 1. Desnaturalización (96°C): la reacción
se calienta bastante para separar, o
desnaturalizar, las cadenas de ADN.
Esto proporciona los moldes de
cadena sencilla para el siguiente paso.
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