Utilizada para
separação de
fragmentos de
DNA e RNA
Separa de
acordo com a
quantidade de
pares de base
(Pb) e carga
Gel composto por agarose em pó
e solução tampão TAE ou TBE
MATERIAIS UTILIZADOS
Gel de agarose
Cuba eletroforética horizontal
Pipetas semi-automáticas
Fonte para eletroforese
Tampão de corrida
Suportes e pentes
Microondas
Balança de precisão
Ladder-Kb
CONCEITO
É uma técnica de separação de
biomoléculas (DNA, RNA e
proteínas) baseada no seu
tamanho e carga em um GEL.
Empregada pela primeira
vez em 1937 por Arne
Tisélius
FUNÇÃO
Biomoléculas possuem carga, portanto, estas são
submetidas a um sistema de polos negativo e
positivo, aplicando-se uma corrente elétrica. De
acordo com sua carga, a molécula migrará para um
dos polos. Se a sua carga for negativa, migrará
para o polo positivo.
Moléculas maiores percorrerão menores distâncias
por terem mais dificuldade de passar através do
gel, enquanto moléculas menores percorrerão
maiores distâncias, pois elas tem mais facilidade.
Baseia-se na migração de moléculas com
cargas, que migram para os polos (negativo ou
positivo) em um sistema em que foi submetido
um potencial elétrico.
Os géis são uma espécie de malha com
poros, que prendem as moléculas durante a
migração. As moléculas de menores
tamanhos terão maior facilidade de passar
por eles e as maiores, mais dificuldade
O tamanho das moléculas, ao
final da migração, são
reconhecidos comparando com
marcadores, moléculas de
tamanhos específicos já
conhecidos.
Para saber onde as moléculas estão e suas distâncias percorridas, é
adicionado um corante que fará com que as moléculas 'brilhem" quando
expostas à luz UV.
EM GEL DE POLIACRILAMIDA
Amplamente utilizada
para separação de
proteínas
A migração ocorre
em suportes
verticais
Separa de acordo com
a massa molecular (M.M)
e carga
MATERIAIS UTLIZADOS
Cuba eletroforética vertical
Placas de vidro
Separadores
Grampos e pentes
Pipetas semi-automáticas
Acrilamida 40%, APS 10%, TMED, TBE 10X
Se faz 2 Géis de poliacrialmida
Gel de corrida
(poliacrilamida 8% a
20%)
Gel de empacotamento
(poliacrilamida 5%)
Tampão de corrida
IMPORTÂNCIA
Papel importante em análises laboratóriais
Auxilia estudos forenses
Grande importância em elaborações
de pesquisas científicas