Parte III. Determinación del punto Isoeléctrico de la caseína.

Descripción

tecnologo BIOQUIMICA Mapa Mental sobre Parte III. Determinación del punto Isoeléctrico de la caseína., creado por Yenny Avella el 24/11/2024.
Yenny Avella
Mapa Mental por Yenny Avella, actualizado hace 4 meses
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Creado por Yenny Avella hace 4 meses
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Resumen del Recurso

Parte III. Determinación del punto Isoeléctrico de la caseína.
  1. a. Coloque aproximadamente 250 mg de caseína en un vaso de 50mL.
    1. b. Agregue 20ml de agua destilada y 5 mL de NaOH 1N; agite hasta lograr una solución total de la caseína.
      1. c. Una vez disuelta la caseína, se vierte en un matraz aforado de 50 ml, adicione 5 mL de ácido acético 1N y diluya con agua destilada hasta 50mL y mezcle bien.
        1. d. La solución debe ser clara y limpia y si no es así, debe volver a filtrar.
          1. e. Coloque el precipitado en un vaso de precipitado pequeño previamente pesado, vuelva a pesar el vaso con el precipitado y luego adicione 5mL/g de éter etílico.
            1. f. Filtre nuevamente.
              1. g. Deseche el líquido quedando un precipitado blanco de fácil manipulación que es la caseína.
                1. a. En diez tubos de ensayo, limpios y secos adicione exactamente los volúmenes de los reactivos según la siguiente tabla: TABLA 1. De disoluciones añadir 1 ml de disolución de caseína a cada tubo.
                  1. b. Medir experimentalmente el pH de todos los tubos, que debe cubrir un rango aproximado semejante al teórico (3 a 6,5). Anotar los valores reales en la Tabla, que deben ser semejantes a los expresados y en todo caso crecientes.
                    1. c. Añadir 1 mL de disolución de caseína preparada en la parte II a cada tubo.
                      1. d. Agitar suavemente cada uno de los tubos y esperar aproximadamente 3 minutos.
                        1. e. Medir la absorbancia de cada muestra a 640 nm.
                          1. f. Graficar la absorbancia frente al pH, y determinar el punto Isoeléctrico experimental para los datos obtenidos
                            1. g. Consultar el punto isoeléctrico teórico de la caseína y compárelo con el punto isoeléctrico experimental obtenido.

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