Cultura PuraSaccharomyces cerevisiae ATCC MYA-797 adquirido na forma liofilizada
ReativaçãoFrasco de Erlenmeyer de 50 mL contendo 10 mL de meio líquido YPD com pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 com TºC 26, 150 rpm por 45 horas
Crescimento1 mL do cultivo transferido para frasco de Erlenmeyer de 50 mL contendo 10mL de meio YPD com pH 5,6. Agitador incubador NOVAMARCA nt 715 com TºC 26, 150 rpm por 20 horas
ConservaçãoVia técnica de Transferência Periódica ou técnica de Congelamento
Técnica de Congelamento1 mL do cultivo transferido para Erlenmeyer de 50mL contendo 10 mL meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por 18 horas. 1 mL de cultivo transferido para frascos de polipropileno estéril. Centrífuga SIGMA 1-14 903 xg por 1 minuto. Descarte do sobrenadante e repetição do procedimento por 3 vezes. Adição de 800 µL de meio YPD pH 5,6 e 200 µL de glicerol. Freezer Consul TºC -18ºC
Técnica de Transferência Periódica1 mL do cultivo transferido para um frasco de Erlenmeyer de 50mL contendo meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por 18 horas. Transferência do cultivo com alça descartável estéril para tubo contendo meio sólido YPD inclinado pH 5,6
Cultivo em laboratório0,3 mL de suspensão 4,5x10^8 células/mL transferido para 8 frascos de Erlenmeyer de 50 mL com 10 mL de meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por: 0, 3, 5, 9, 12, 18, 24 e 30 horas.
Inóculo em laboratórioFase log obtida em 20h em meio YPD pH 5,6 sob agitador e incubador a 150 rpm. 4,2x10^8 células totais/mL.
Cultivo industrial
Inóculo
Matérias-primasExtrato de levedura 10g/L, Peptona 20g/L, Dextrose 20g/L
Matérias-primasCana-de-açúcar variedade RB-785148
Meio de cultivoYPD pH 5,6 TºC 26
EsterilizaçãoAutoclave com calor úmido sob pressão de 1 atm e temperatura de 121ºC por 15 minutos
Controles
Temperatura, pH, taxa de aeração, concentração do substrato, concentração do produto, oxigênio dissolvido, potência e velocidade do agitador, análise dos gases e controle de espuma