Blocos seccionados em fatias finas, permitindo assim, a visualização das células e
elementos intracelulares pela microscopia de luz (corte realizado pelo micrôtomo)
Colocação do tecido em molde de parafina que permite a
microtomia
Formação do bloco
histológico
Desidratação
Clarificação
Processo de remoção do álcool nos tecidos através
de um agente clarificador. Assim, a parafina pode
penetrar completamente no interior dos tecidos
Infiltração
Saturação das cavidades dos tecidos ou das células por uma
substância que é geralmente o meio que estes serão
inclusos
Completa remoção da água na amostra para
utilizar a parafina, que é hidrofóbica. Feita
por difusão de agentes desidratantes
Reúne procedimentos que visam substituir a água dos tecidos por um meio mais sólido, que confira
resistência e dureza suficiente
Tipos
Ácidos (mais utilizados na histologia); Histoquímicos; Soluçnoes descalcificadoras patenteadas; Resinas
de troca iônica; Descalcificadores eletrolíticos
Fatores a serem levados em conta para escolha do
método
Urgência do material; O grau de mineralização do tecido; A coloração a ser empregada; O tipo de fixador
utilizado
Processo de redução de tamanho e espessura dos fragmentos
fixados
Permite, de forma mais eficaz, a penetração do fixador e subsequentemente
a melhor difusão dos reagentes durante o processamento histológico
Principal etapa das técnicas
histológicas
Objetivos:
Evitar a autólise e a proliferação bacteriana; Parar o metabolismo
celular; Preservar os tecidos; Melhorar a diferenciação óptica das
células; Manter as relações topológicas e morfológicas das
biomacromoléculas o mais próximo da situação "in vivo"
Métodos:
Químicos: Processo de estabilização de
biomoléculas pela ação de agentes químicos
Físicos: Promove a conservação da amostra através de seu aquecimento ou
resfriamento
Fatores que influeciam
Temperatura; Volume da mistura fixadora; Concentração; pH da mistura fixadora;
Osmolaridade; Espessura da amostra; Tempo de fixação
Procedimento de retirada de uma amostra biológica de um organismo vivo ou
morto, obtidas através de biópsias, peças cirúrgicas ou necropsias
Antes da coleta, deve-se organizar o espaço, separar os utensílios a serem utilizados durante o procedimento e preparar o líquido fixador em um frasco de
boca larga
Os órgãos produtores de enzimas devem ser retirados primeiro, já que nesses a autólise ocorre mais rapidamente