Deshidratación: reactivos ysustancias alternativas

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Jessica  Llulema
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Deshidratación: reactivos ysustancias alternativas
  1. Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración
    1. .La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química. Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son consistentes con la preservación de tejidos
      1. . El más común es el reemplazamiento gradual de agua con un solvente orgánico por transferencia del tejido a través de soluciones de concentraciones crecientes (etanol, acetona)-referido como una serie de deshidratación graduada
        1. La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química. Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son consistentes con la preservación de tejidos
        2. Un método menos común en microscopía de campo claro es una deshidratación rápida utilizando un reactivo orgánico (metil celosolve, dimetoxipropano, trietil fosfato).
          1. Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración
          2. La mayoría de los solventes de deshidratación no son también solventes de parafina; por tanto incorporaremos varios pasos de intermediarios para mover el tejido del agente deshidratante hasta la parafina. Ejemplos de agentes intermedios son Histo-Clear, xileno, isopropanol, y tert-butil alcolhol (TBA).
            1. El isopropanol es preferido cuando se usa la técnica de micro ondas. El huso de Histo-Clear extraerá un fino pegamento amarillo que atrapará y destruirá las muestras de tejidos. A 58ºC la extracción puede ocurrir dentro de una semana. Cuando infiltramos en plástico, no se requiere un solvente intermediario
              1. Es importante tener presente que los pasos de la solución de deshidratación e infiltración son solventes orgánicos. Por tanto, cuando etiquetes las muestras de tejidos usa pequeñas etiquetas de papel escritos con lápiz y no con boli. Pon la etiqueta en el vial con la muestra de tejido. Los solventes orgánicos disolverán el pegamento que está sobre la etiqueta del vial y la tinta que usaste mara marcar la etiqueta.
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