Ensaio imunoenzimático para a pesquisa de anticorpos e ou antígenos.
Consiste no isolamento do componente (anticorpo/antígeno) em partícula sólida e um conjugado.
Neste método, a positividade será avaliado pela mudança de cor após adição de substrato específico
e será medido por um espectrofotômetro.
Entre os método de ELISA, destaca-se o método ELISA SANDUICHE
Neste método, é fixado um anticorpo específico na fase sólida e
adicionado a amostra que se deseja pesquisar o antígeno, em
seguida adiciona-se anticorpo específico conjugado com enzima.
Além do ELISA sanduiche, há também os métodos: Direto, Indireto e Competitivo:
O antígeno ou anticorpo será fixado à placa e o local
de ligação fará competição do antígeno ou anticorpo da
amostra com um outro pipetado no kit. Esta competição
torna o valor da leitura inversamente proporcional, pois
quanto menos quantidade da substância a ser
identificada, menos sítios de ligação serão utilizados por
elas, os outros sítios de ligação serão ocupados pelas
substâncias que foram adicionadas.
MÉTODO DE LEITURA
As placas serão inseridas em um leitor que irá
realizar a leitura através da emissão de luz e
ondas específicas, avaliando a quantidade
absorvida e refletida.
Um antígeno é fixado na placa e é realizado
duas adições: um anticorpo ligado é ligado a
uma enzima específica e após um insere-se
um anticorpo ligado a uma enzima que se
ligará ao primeiro anticorpo
Um antígeno é fixado na placa e
adiciona-se um anticorpo ligado a
enzima