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Description
Mind Map by Brandon Romano Fenix, updated more than 1 year ago
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Created by Brandon Romano Fenix
about 4 years ago
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Reacción en Cadena de la Polimerasa.
- Es una reacción química utilizada para amplificar
(crear copias) fragmentos de ADN,
- Esta reacción permite que unos pocos fragmentos de ADN se repliquen
en millones o miles de millones de copias para estudiar la molécula en
detalle en laboratorio.
- El proceso de PCR por lo general consiste en
una serie de 20 a 35 cambios repetidos de
temperatura llamados ciclos.
- Cada ciclo suele consistir ciclos que tienen
tres pasos de temperatura
- Cada ciclo suele consistir ciclos que tienen
tres pasos de temperatura
- Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de las ADN
polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo cual se emplean ciclos
de altas y bajas temperaturas alternadas.
- Esto para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase y,
dejar que las hebras de ADN se unan para duplicarlas nuevamente.
- Esto para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase y,
dejar que las hebras de ADN se unan para duplicarlas nuevamente.
- Sus pasos constan de:
- Desnaturalización.
- siendo el calentamiento (94-95 °C) de la muestra la forma más habitual. La
temperatura a la cual se decide realizar la desnaturalización depende, por ejemplo,
de la proporción de G+C que tenga la cadena, como también del largo de la misma.
- siendo el calentamiento (94-95 °C) de la muestra la forma más habitual. La
temperatura a la cual se decide realizar la desnaturalización depende, por ejemplo,
de la proporción de G+C que tenga la cadena, como también del largo de la misma.
- Alineamiento
- Se producirá la hibridación del cebador que se unirá a su secuencia
complementaria en el ADN molde. Para ello es necesario bajar la
temperatura a 40-68 °C durante 20-40 segundos, permitiendo así el
alineamiento.
- Se producirá la hibridación del cebador que se unirá a su secuencia
complementaria en el ADN molde. Para ello es necesario bajar la
temperatura a 40-68 °C durante 20-40 segundos, permitiendo así el
alineamiento.
- Elongación
- Actúa la polimerasa, tomando ADN molde para sintetizar la cadena
complementaria. Sintetiza una nueva hebra de ADN complementaria a la
hebra molde añadiendo los dNTP complementarios en dirección 5'→ 3'
- Actúa la polimerasa, tomando ADN molde para sintetizar la cadena
complementaria. Sintetiza una nueva hebra de ADN complementaria a la
hebra molde añadiendo los dNTP complementarios en dirección 5'→ 3'
- Desnaturalización.
- Los usos de la PCR en el campo de la
Genetica pueden ser como
- PCR múltiple (PCR-M) de 19 a 22 exones usada como Técnica molecular
en Deleciones Parciales Intragénicas en los Principales tipos de
mutaciones en el gen de Distrofias Musculares de Duchenne
- PCR en tiempo real. Técnica molecular para identificación de mujeres
portadoras de Deleciones parciales intragénicas
- PCR en tiempo real. Técnica molecular para identificación de mujeres
portadoras de Deleciones parciales intragénicas
- Estudio molecular por “PCR extensa” para la identificación de la
inversión génica del intrón 22 del gen
- El estudio molecular de todo paciente con hemofilia tipo A grave debe iniciar con la búsqueda dirigida
por Southern blot o por un ensayo de “PCR extensa”
- El estudio molecular de todo paciente con hemofilia tipo A grave debe iniciar con la búsqueda dirigida
por Southern blot o por un ensayo de “PCR extensa”
- PCR múltiple (PCR-M) de 19 a 22 exones usada como Técnica molecular
en Deleciones Parciales Intragénicas en los Principales tipos de
mutaciones en el gen de Distrofias Musculares de Duchenne
- El proceso de PCR por lo general consiste en
una serie de 20 a 35 cambios repetidos de
temperatura llamados ciclos.
- Esta reacción permite que unos pocos fragmentos de ADN se repliquen
en millones o miles de millones de copias para estudiar la molécula en
detalle en laboratorio.
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