Imunofluorescência

Indireta
1. Vantagens
  1. Desvantagens
    1. Necessita microscópio de fluorescência
      1. Subjetividade na leitura
        Não-automação
  2. Sensibilidade
    1. Especificidade
      1. Simples padronização e execução
        Mesmo conjugado pode ser usado em sistemas diferentes
2. Detecção de algumas doenças
  1. Doença de Chagas
    1. Aids
      1. Hepatites
        Complexos em doenças autoimunes
3. Preparação
  1. Antígenos padronizados fixados na lâmina de vidro
    1. Soro diluído posto sobre antígeno e incubado para permitir formação complexo antigeno-anticorpo
      1. Lavagem para retirada dos anticorpos não ligados
        Reage com anticorpo do soro
Direta
1. Detectar
  1. Virus
    1. Parasitas
      1. Antígenos de tumor
2. Amostras
  1. fezes
    1. urina
      1. cortes de tecido
        secreções
3. Preparação
  1. Fixação por esfregaço na lâmina
    1. Tratamento com anticorpo marcado
      1. Incubação
        Lavagem para remoção do excesso dos que não se ligaram
        Visualização no microscópio de fluorescência
4. Vantagens
  1. Alta especificidade
    1. Possibilita detecção de proteinas intracelulares e de sua localização
  2. Desvantagens
    1. Alto custo do microscópio de fluorescência
      1. Necessidade de conjugado para cada antígeno que se deseja identificar
        Subjetividade de leitura
Visualização de Antígenos e anticorpos em suspensões celulares ou tecidos
1. Fluorocromos
  1. Componente de uma molécula que promove fluorescência
  2. Absorvem radiação
    1. Corantes
    2. Excitados emitem luz visível
  3. Isiotiocionato de fluorosceína é o mais usado
    1. Verde
  4. Rodamina
    1. Vermelha

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