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Description
Mind Map by AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA, updated more than 1 year ago
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Created by AIDA FERNANDA NAVARRO REYNA
about 3 years ago
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Cultivo
Celular
- Inicio
- Siembra
- Agregar en un tubo cónico de 50mL el
Medio RPMI-1640, el Suero Fetal Bovino
(SFB), L-glutamina y los antibióticos.
- Homogenizar
- Filtrar y trasladar 9mL del
medio con suplementos en un
tubo cónico de 15mL
- Agregar 100L de
fitohemaglutina
- Agregar 1mL de sangre
- Homogenizar
- Incubar a 37°C por
72 horas
- Cosecha
- Agregar 100L de colchicina
(concentración de colchicina:
10g/mL).
- Incubar por 10
minutos a 37°C.
- Centrifugar 4000rpm por
8mins. y resuspender en
10mL de KCl 75 micro M
- Dejar incubar 20
minutos a 37°C.
- Centrifugar 4000rpm
por 8mins. y descartar
el sobrenadante
- Agregar 1mL de FIX a
4°C, gota a gota hasta
completar 10mL.
- Incubar 30 minutos a
temperatura ambiente.
- Centrifugar 4000rpm por
8mins. y descartar
sobrenadante dejando
micro1mL
- Agregar 10mL de FIX
a 4°C, gota a gota el
primer mililitro.
- Incubar 5 minutos a temperatura
ambiente y centrifugar a 4000rpm
por 8mins.
- Descartar el sobrenadante y dejar
1mL y resuspender
- Rotular con número de mesa y
sección, y guardar a -20°C.
- FIN
- FIN
- Rotular con número de mesa y
sección, y guardar a -20°C.
- Descartar el sobrenadante y dejar
1mL y resuspender
- Incubar 5 minutos a temperatura
ambiente y centrifugar a 4000rpm
por 8mins.
- Agregar 10mL de FIX
a 4°C, gota a gota el
primer mililitro.
- Centrifugar 4000rpm por
8mins. y descartar
sobrenadante dejando
micro1mL
- Incubar 30 minutos a
temperatura ambiente.
- Agregar 1mL de FIX a
4°C, gota a gota hasta
completar 10mL.
- Centrifugar 4000rpm
por 8mins. y descartar
el sobrenadante
- Dejar incubar 20
minutos a 37°C.
- Centrifugar 4000rpm por
8mins. y resuspender en
10mL de KCl 75 micro M
- Incubar por 10
minutos a 37°C.
- Agregar 100L de colchicina
(concentración de colchicina:
10g/mL).
- Cosecha
- Incubar a 37°C por
72 horas
- Homogenizar
- Agregar 1mL de sangre
- Agregar 100L de
fitohemaglutina
- Filtrar y trasladar 9mL del
medio con suplementos en un
tubo cónico de 15mL
- Homogenizar
- Agregar en un tubo cónico de 50mL el
Medio RPMI-1640, el Suero Fetal Bovino
(SFB), L-glutamina y los antibióticos.
- Siembra
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