Técnica muy sensible.
Competencia de unión
al Anticuerpo específico
entre la sustancia a
cuantificar y las
cantidades conocidas de
la sustancia marcada.
RIA
Se realiza una mezcla con el
anticuerpo, Antígeno frío y
Antígeno caliente.
Los Antígenos competirán en
igualdad de condiciones para
unirse con el anticuerpo
Se separa el complejo
Anticuerpo-Hormona:Precipitación,
Absorción, Precipitación
Inmunológica, Fase Sólida.
Se realiza la
medición y se
elabora curva
patrón
RIA de inhibición
Sin antigeno marcado,Se
inmoviliza una cantidad
de antígeno en un
soporte sólido. Saturar
con BSA
Se añade una
cantidad de
Anticuerpo
marcado y el
antígeno a
medir.
Se eliminan lo que no
ha sido unidoy se
determina la cantidad
de anticuerpo marcado
que se ha inmovilizado
Curva anticuerpo
marcado
inmovilizado contra
la concentración de
antígeno soluble.
RIA IRMA
Se inmoviliza una concentración
del Ac1 en un soporte sólido
Se añade la muestra problema de Ag
Se añade Ac*2 que se una
a otro epítopo del Ag.
Eliminación del Ac*2 no unido.
Se determina la
cantidad de
anticuerpo
marcado unido.
Análisis inmunoenzimáticos
Wenstern blot
Las
muestras
pueden ser
de un tejido
o de cultivo
celular,
identifica
una sola
proteína
dentro de
una muestra
biológica,
especificidad
por la unión
de
anticuerpo
por un solo
epítopo del
antígeno
Electroforesis en
gel poliacrilamida.
Transferencia -
Difusión simple -
Transferencia al
vacio -
Electrotransferencia
Bloqueo
Detección: Según el
sustrato puede
realizarse la detección
Exploraciones
secundarias
ELISA
Anticuerpos marcados
directo
Fijación al
soportede
antígenos
específicos
Adición de
anticuerpos
marcados
lavado y
adición del
sustrato
lectura
indirecto
Fijación
al soporte
Adición de
suero problema
Adición de anticuerpos
marcados, más sustrato
letura
Sándwich
Fijación
al soporte
Adición de
la muestra
Adición de
anticuerpos
específicos
adición de
sustrato y lectura
Técnica de inmunoensayo en
el cual un antígeno se detecta
mediante un anticuerpo
enlazado a una enzima
Anticuerpos
sin marcar
competitivo
Fijación
al soporte
Adición de una mezcla de
antígenos del anticuerpo
Adición de un
sustrato y lectura
Quimioluminiscencia
Fluoroinmunoensayo
Fluoroinmunoanalisis de
polarización de fluorescencia
Inmunoanalisis de fluorescencia
con el sustrato marcado (SLFA)
Fluoroinmunoanalisis
de disociación
aumentada por
lantánidos (DELFIA)
Inmunoanalisis
de transferencia
de energia de
fluorescencia
(FETI)
Emisión de radiación
electromagnética
producida por una
reacción química