Realizar extracción de ADN de tejidos
animales y vegetales mediante
diferentes métodoa
INTRODUCCIÓN
El ADN es la parte fundamental de los cromosomas,
constituídas por diminutos filamentos se han ideado
varios métodos para realizar esta extracción que se basa
fundamentalmente en la liberación de membranas con
sustancias lipídicas para capturarlas en medios adecuados
de pH.
MATERIALES Y REACTIVOS
Muestra vegetal o animal
Batidora o picadora
Cloruro de sodio
Detergente líquido
o champú
Colador
Ablanda carnes,
zumo de piña
Agua (destilada
o mineral
Nevera
Varilla fina
Vaso de precipitado
Tubo se ensayo
Bicarbonato de sodio
Alcohol isolámico
y etílico a 0·C
Pipeta
MÉTODOS DE EXTRACCIÓN
DE ADN CASEROS
3. 1 Mezclar sal normal,
bicarbonato de sodio, agua
mineral y detergente líquido en
un vaso de precipitado. Mantener
en frío.
3. 2 Agregar solución anterior a
un tubo de ensayo y escupa
10 veces.
3. 3 Con el tubo inclinado,
agregar alcohol isolámico
frío.
3. 4 Con la punta de una varilla
delgada, mediante un
movimiento hacia delante y
hacia atrás, se irán enrollando
los fragmentos de mayor
tamaño de ADN.
4. 1 Disolver sal y
detergente líquido en
un vaso de agua.
4. 2 Cortar en cuadritos la zona
central de una cebolla y agregar a la
anterior solución.
4. 3 Depositar la mezcla en una
picadora a máxima velocidad
durante 30 segundos.
4. 4 Filtrar el picado,
obteniéndose el extracto y
deposítelo hasta un cuarto
de un tubo de ensayo.
4. 5 Añadir al tubo de
ensayo otro poco
de zumo de piña
mezclar.
4. 6 Agregue un volumen de
alcohol muy frío igual al del
filtrado, cuidadosamente,
haciéndolo resbalar por las
paredes del vaso.
4. 7 Deje reposar durante unos
minutos hasta que se forme una
zona turbia entre las dos capas.
4. 8 Introducir una varilla y
muévala adelante y atrás, para
extraer las fibras blancas de ADN.
1. 1 Disolver cloro
en agua.
1. 2 Cortar material vegetal o
animal en cuadritos y triturar
hasta obtener un macerado
1. 3. Mediante un filtro
extraer macerado de lo
anterior
1. 4.. Añadir extracto a la
solución salina, agregar
detergente líquido, mezclar y
deja en refrigeración
1. 5. Depositar en un tubo de
ensayo la anterior mezcla y
añadir ablandador de carne o
de zumo de papaya o piña y
agitar suavemente.
1. 6. Añadir alcohol isoamílico a
0ºC, delicadamente con el tubo
de ensayo inclinado, dejar
reposar
1.7 Con la punta de una varilla
de vidrio delgada, justo
debajo de la separación
entre el alcohol y la mezcla,
se irán enrollando los
fragmentos de mayor
tamaño de ADN.
2.1 Preparación de solución de
Buffer: Mezclar agua destilada,
sal de cocina, bicarbonato de
sodio, champú o detergente.
Mantener refrigerado.
2. 2 Cortar en cuadritos la
muestra de la que se va a
extraer el ADN, triturar
en picadora.
2. 3 En un vaso de precipitado mezclar el
triturado con el buffler, agitar fuerte. Por
filtración. Retire los restos vegetales.
2. 4 Mezclar ablandador
de carne y zumo de piña.
Agitar suavemente.
2. 5 Introduzca una delgada
varilla de vidrio para observar
como se enrollan los
fragmentos de ADN