Parte III.
Determinación del
punto Isoeléctrico
de la caseína.
a. Coloque
aproximadamente 250
mg de caseína en un
vaso de 50mL.
b. Agregue 20ml de agua
destilada y 5 mL de NaOH 1N;
agite hasta lograr una solución
total de la caseína.
c. Una vez disuelta la caseína,
se vierte en un matraz aforado
de 50 ml, adicione 5 mL de
ácido acético 1N y diluya con
agua destilada hasta 50mL y
mezcle bien.
d. La solución debe ser clara y
limpia y si no es así, debe volver
a filtrar.
e. Coloque el precipitado en
un vaso de precipitado
pequeño previamente
pesado, vuelva a pesar el
vaso con el precipitado y
luego adicione 5mL/g de
éter etílico.
f. Filtre nuevamente.
g. Deseche el líquido quedando un precipitado blanco de fácil
manipulación que es la caseína.
a. En diez tubos de ensayo, limpios y secos
adicione exactamente los volúmenes de los
reactivos según la siguiente tabla: TABLA 1.
De disoluciones añadir 1 ml de disolución de
caseína a cada tubo.
b. Medir experimentalmente
el pH de todos los tubos, que
debe cubrir un rango
aproximado semejante al
teórico (3 a 6,5). Anotar los
valores reales en la Tabla,
que deben ser semejantes a
los expresados y en todo
caso crecientes.
c. Añadir 1 mL
de disolución de
caseína
preparada en la
parte II a cada
tubo.
d. Agitar suavemente
cada uno de los tubos
y esperar
aproximadamente 3
minutos.
e. Medir la
absorbancia de
cada muestra a
640 nm.
f. Graficar la
absorbancia frente al
pH, y determinar el
punto Isoeléctrico
experimental para
los datos obtenidos
g. Consultar el punto
isoeléctrico teórico
de la caseína y
compárelo con el
punto isoeléctrico
experimental
obtenido.