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Description
Mind Map by nelson garcia, updated more than 1 year ago
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Created by nelson garcia
about 8 years ago
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Técnicas Inmunohematológicas
- Clasificación de grupo ABO y D, con técnicas en tubo y antisueros
comerciales METODO: a) Colocar en la gradilla 4 tubos para cada uno de
los sueros clasificadores, un tubo para prueba autóloga y 2 tubos para
los glóbulos A y B respectivamente. b) Colocar en cada tubo una gota de
cada uno de los sueros clasificadores, en el tubo de la prueba autóloga
colocar suero o plasma y glóbulos rojos del paciente y en los tubos
siguientes Glóbulos A y glóbulos B según corresponda. c) Agregar a cada
tubo que contiene los sueros clasificadores, 1 gota de glóbulos del
paciente que se va a clasificar y a los tubos que tienen los glóbulos A y B
colocar dos gotas de suero o plasma del paciente.
- Pruebas de coombs directa, (Técnica en Gel) Muestra:
G.R. al 1% dispensando 1 vol.( 1 ml) de “SOL. I” y 10 l de
sedimento de G.R. Procedimiento: Identificar cada
tarjeta Añadir 50 l de G.R. al 1% en cada pocillo
Centrifugar por 10 min Leer NOTA: Terminado el tiempo
de centrifugación se debe leer inmediatamente, si no es
posible retirar de la centrifuga y dejar en espera en la
gradilla correspondiente. De los exámenes realizados en
los turnos de noche se debe dejar la tarjeta para cotejar
lectura en la entrega de turno en presencia de un
profesional.
- Pruebas de coombs directa, (Técnica en Gel) Muestra:
G.R. al 1% dispensando 1 vol.( 1 ml) de “SOL. I” y 10 l de
sedimento de G.R. Procedimiento: Identificar cada
tarjeta Añadir 50 l de G.R. al 1% en cada pocillo
Centrifugar por 10 min Leer NOTA: Terminado el tiempo
de centrifugación se debe leer inmediatamente, si no es
posible retirar de la centrifuga y dejar en espera en la
gradilla correspondiente. De los exámenes realizados en
los turnos de noche se debe dejar la tarjeta para cotejar
lectura en la entrega de turno en presencia de un
profesional.
- Clasificación de grupo ABO. Técnicas en tubo y suero de paciente (reversa) a)
Tomar dos tubos de Khan, rotular con GR. A, y GR. B respectivamente y el Nº de la
muestra del paciente, b) Agregar dos gotas de suero del paciente al tubo marcado
A c) Agregar dos gotas de suero del paciente al tubo marcado B d) Añadir a cada
tubo 1 gota de suspensión de GR. A y 1 gota de suspensión de GR. B
respectivamente y mezclar e) Incubar al menos 15 minutos o centrifugue a 1000
rpm. por un minuto en centrífuga clínica, f) Resuspenda las células con agitación
suave. Los resultados de detección deben ser observados macroscópicamente. g)
Interpretación del resultado: Aglutinación es un resultado positivo del ensayo y
refleja la presencia de una reacción antígeno-anticuerpo. Si no se produce
aglutinación indica la ausencia de una reacción antígeno-anticuerpo, h) Leer y
anotar los resultados en la hoja de registro de “protocolo de receptores”.
- Pruebas de coombs indirecta (Técnica en Gel) Para la detección de anticuerpos
irregulares a) Tomar una tarjeta de gel que contiene suero de Coombs
Poliespecífico, ubicados a temperatura ambiente (no utilizar tarjetas que
presenten deshidratación o variación en su presentación al examen ocular), b)
Marcar cada pocillo con la identificación del paciente. Retirar el sello que
recubre el pocillo. c) Diluir los Glóbulos Rojos de los frascos de “Panoscreen” de
la siguiente manera: Marcar un frasco I y otro II; Al primer frasco I agregar una
gota (50 ul.) de Glóbulos Rojos I ya agitados y agregar 200 ul. de Solución 2 Al
frasco marcado II agregar una gota (50 ul.) de Glóbulos Rojos II ya agitados y
agregar 200 ul. de Solución 2. d) Añadir 50 ul.(una gota) de las solución de
glóbulos rojos ya preparada a cada pocillo según corresponda (I, II). e) Añadir
25 ul de suero o plasma del paciente a cada pocillo. f) Incubar 15 minutos a 37°
C. g) Centrifugar por 10 minutos
- Pruebas de coombs indirecta (Técnica en Gel) Para la detección de anticuerpos
irregulares a) Tomar una tarjeta de gel que contiene suero de Coombs
Poliespecífico, ubicados a temperatura ambiente (no utilizar tarjetas que
presenten deshidratación o variación en su presentación al examen ocular), b)
Marcar cada pocillo con la identificación del paciente. Retirar el sello que
recubre el pocillo. c) Diluir los Glóbulos Rojos de los frascos de “Panoscreen” de
la siguiente manera: Marcar un frasco I y otro II; Al primer frasco I agregar una
gota (50 ul.) de Glóbulos Rojos I ya agitados y agregar 200 ul. de Solución 2 Al
frasco marcado II agregar una gota (50 ul.) de Glóbulos Rojos II ya agitados y
agregar 200 ul. de Solución 2. d) Añadir 50 ul.(una gota) de las solución de
glóbulos rojos ya preparada a cada pocillo según corresponda (I, II). e) Añadir
25 ul de suero o plasma del paciente a cada pocillo. f) Incubar 15 minutos a 37°
C. g) Centrifugar por 10 minutos
- Investigación de la variante
DU a) Colocar en un tubo una
gota de suero anti D y una
gota de glóbulos del paciente
suspendidos en su propio
suero o plasma. b) Incubar a
37°C por 15 minutos. c) Lavar
4 veces en salino o buffer.
Eliminar el máximo de
sobrenadante después del
último lavado. d) Agregar una
gota de suero Antiglobulina
humana (Coombs). e)
Centrifugar a 1000 rpm
durante 1 minuto. Observar si
existe aglutinación
macroscópica.
- Pruebas de compatibilidad con técnicas
en tubo a) Tomar la unidad de glóbulos
rojos a transfundir, b) Tomar un tubo de
Khan y un tubo plástico, ambos
rotularlos con los cuatro últimos dígitos
del código de barra de la unidad a
transfundir, c) Sacar tubuladura y
agregar una gota de glóbulos rojos al
tubo de Khan, el resto de la tubuladura
se inserta en el tubo plástico, que se
guarda en el refrigerador (recipiente
muestras diarias) d) Se resuspende la
gota del tubo Khan en solución PBS
obteniendo dilución al 5%, centrifugar
por 1 minuto a 2500 rpm,, botar
sobrenadante, escurrir en papel
absorbente, e) Añadir 2 gotas de suero
o plasma del receptor, f) Agitar y añadir
2 gotas de LISS, mezclar bien, g) Incubar
al menos 15 minutos a 37° C.(se puede
incubar hasta 60 minutos), centrifugar
el tubo durante 1 minuto a 1000 rpm.
en centrífuga clínica y examinar
macroscópicamente para determinar si
se produce hemólisis y/o aglutinación,
h) Lavar 3 veces, durante 1 minuto a
- Pruebas de compatibilidad con técnicas
en tubo a) Tomar la unidad de glóbulos
rojos a transfundir, b) Tomar un tubo de
Khan y un tubo plástico, ambos
rotularlos con los cuatro últimos dígitos
del código de barra de la unidad a
transfundir, c) Sacar tubuladura y
agregar una gota de glóbulos rojos al
tubo de Khan, el resto de la tubuladura
se inserta en el tubo plástico, que se
guarda en el refrigerador (recipiente
muestras diarias) d) Se resuspende la
gota del tubo Khan en solución PBS
obteniendo dilución al 5%, centrifugar
por 1 minuto a 2500 rpm,, botar
sobrenadante, escurrir en papel
absorbente, e) Añadir 2 gotas de suero
o plasma del receptor, f) Agitar y añadir
2 gotas de LISS, mezclar bien, g) Incubar
al menos 15 minutos a 37° C.(se puede
incubar hasta 60 minutos), centrifugar
el tubo durante 1 minuto a 1000 rpm.
en centrífuga clínica y examinar
macroscópicamente para determinar si
se produce hemólisis y/o aglutinación,
h) Lavar 3 veces, durante 1 minuto a
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