Método HPLC

Mejorada de cromatografía en columna
1. Columnas que actúan bajo Gravedad
2. Alcanzan hasta 400 atmósferas
3. Columna de 150 mm x 4.6 mm, 5 micrómetros
4. Se utiliza una bomba de alta presión
Métodos
1. Elución Gradiente
2. Elución Isocrática
Métodos de detección
1. HPLC de fase normal
  1. Columnas llenas de Silice
  2. Disolvente no polar
  3. Longitud de onda 150 a 250 nm
2. HPLC de fase inversa
  1. Sílice no polar C18
  2. Disolvente polar
  3. Menos solubles en el solvente
Preparación de la muestra
1. 1er lavado 2 veces con NaCl al 10%
2. 2do lavado 3 veces con agua destilada
3. Tratarlo con ácido acético al 0.5 M
4. Se limpia con NaCl 0.9 M
5. Se disuelve en etanol
6. La solución de etanol, se mezcla con colageno
Condiciones Cromatográficas
1. Elección de la columna
2. Fase móvil con caudal de 1 ml/min
3. Volumen de inyección de 20 microlitros
4. Temperatura de la columna idónea
5. Longitud de onda
Preparación de soluciones estándar
1. Se transfieren 6.16 gr de muestra
2. Se diluye con acetonitrilo
3. Se realizan diluciones
Preparación de la muestra
1. Pesar 50 gr en viales
2. Extracción de muestra con metanol
3. Filtración de soluciones de Extracción
4. Inyección de alícuotas a 20 micrometros
Resultados

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	Created by josue raul dominguez almost 7 years ago