Obtención de un determinado componente celular
mediante un conjunto de diversos métodos y técnicas
Se puede observar: orgánulos, fracciónes de
membrana, complejos multiproteicos (citoesqueleto
de actina, microtúbulos, poros nucleares, etc.) *
Método más común de separación
Centrifugación Diferencial
Diferencial de densidad entre la partícula
a sedimentar y la densidad del medio en
el que se encuentra Sedimentación - Es el
transporte de partículas en un campo de
fuerza de centrifugación
Centrifugación zonal
la muestra a analizar se deposita
en la parte superior de un
gradiente de densidades
previamente formado
Ultracentrifugación
BACTERIANA
Métodos fenotípicos
Los esquemas tradicionales de
identificación fenotípica
bacteriana se basan en las
características «observables»
de las bacterias, como su
morfología, desarrollo, y
propiedades bioquímicas y
metabólicas.
Dentro de esta batería de pruebas
bioquímicas se destacarían las:
Características macroscópicas: morfología y
hemólisis; Cultivo: Medios de cultivo y requisitos
de crecimiento en relación a atmósfera,
temperatura y nutrición.
Pruebas bioquímicas, diferenciando
1) Pruebas que se utilizan en la identificación preliminar y con lectura inmediata como la catalasa y
oxidasa
2) otras pruebas rápidas, con lectura en menos de 6h tal y como la hidrólisis del hipurato, la
β-galactosidasa (ONPG), las aminopeptidasas, la uresa y el indol
3) pruebas lentas, con lectura de 18 a 48h que incluirían la óxido-fermentación, reducción de nitratos,
rojo de metilo, Voges-Proskauer, Agar hierro de Kligler, fermentación de azúcares, hidrólisis de la
esculina, coagulasa, fenilalanina-desaminasa, DNasa, hidrólisis de la gelatina, decarboxilasas, lipasa,
lecitinasa, utilización de citratos, utilización de malonato, y prueba de CAMP entre las más frecuentes
Métodos moleculares
La ausencia de concordancia entre las
características observables, morfológicas
y/o fenotípicas del aislamiento en estudio y
las correspondientes a la(s) cepa(s) de la
especie tipo, hacen que los métodos
fenotípicos realizen la identificación más
probable y no definitiva.
El ARNr 16S (rrs)
16S-23S ARNr
ARNr 23S
subunidad β de la ARN
polimerasa,subunidad ß de la
ADN girasa
PARASITARIA
Método directo
Observación del
agente etiológico
Método indirecto
detección indirecta del
parasito
Método de Strout para diagnosticar
la enfermedad de Chagas Biopsias