Reaccion en
Cadena de la
Polimerasa
- es un metodo enzimatico que permite la
sintesis in vitro de multiples copias de una
secuencia determinada de ADN
- se realizaran un ejemplo
del ADN de Diana
- se realizaran un ejemplo
del ADN de Diana
- Los Componentes
son:
- Ejemplo de la composicion
de una Mescla de
Reaccion
- Ejemplo de la composicion
de una Mescla de
Reaccion
- La Desnaturalizacion: es la
separacion inicial de la doble helice
del ADN en dos cadenas sencillas
- se eleva la temperatura de 4 c a 95 c en 2
minutos
- Se mantiene la temperatura
durante 30 seg mas y sucede la
Desnaturalizacion (ciclo 01)
- A los 3 min del ADN de Diana se unen
las primeras Primers. La temperatura
varia en funcion de la composicion de
bases de los Primer (50-60 C)
- Ciclo 1 -
Annealing
- La Taq ADN polimerasa sintetiza la
cadena complementaria a partir del
primer. Este primer ciclo sobrepasa los
limites de la secuencia Diana.
- Ciclo 1 -
Extencion
- Desnaturalizacion
- (ciclo 02)
- Annealing
- (Ciclo
2)
- Extencion
- (Ciclo 2)
- Desentalizacion
- (Ciclo 3)
- Annealing
- (Ciclo 3)
- Extension
- (Ciclo 3)
- 2 ADN Diana
- (Ciclo 3)
- Desnaturalizacion
- (Ciclo 4)
- Annealing
- (Ciclo 4)
- Extension
- (Ciclo 4)
- 8 ADN Diana
- (Ciclo 4)
- (Ciclo 4)
- (Ciclo 4)
- (Ciclo 3)
- (Ciclo 3)
- (Ciclo 3)
- (Ciclo 3)
- (Ciclo 2)
- (Ciclo
2)
- (ciclo 02)
- Desnaturalizacion
- Ciclo 1 -
Extencion
- Ciclo 1 -
Annealing
- A los 3 min del ADN de Diana se unen
las primeras Primers. La temperatura
varia en funcion de la composicion de
bases de los Primer (50-60 C)
- Se mantiene la temperatura
durante 30 seg mas y sucede la
Desnaturalizacion (ciclo 01)
- se eleva la temperatura de 4 c a 95 c en 2
minutos
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