Criado por Maria Clara Sampaio
aproximadamente 3 anos atrás
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Questão | Responda |
Métodos Gerais de Estudos | Métodos e técnicas utilizadas no processo de obtenção da preparação histológica |
Preparação histológica (conceito) | Material formado por uma lâmina de vidro e uma lamínula (de espessura nunca maior que 0.17 mm) que abrigam no meio uma fina camada de matéria orgânica |
Preparação histológica (classificações) | -Permanente ou mediato -A fresco ou imediato |
Mediato e Imediato | -A preparação histológica do tipo mediata/permanente apresenta a vantagem de ter seu tempo de vida útil mais longo em relação à imediata/fresco, cuja vida útil é mais limitada |
Elaboração do plano de trabalho (etapas) | -Escolha do animal respeitando a fauna -Coleta de peças necessárias -Execução das etapas de processamento histológico -Listagem do material cirúrgico e reagentes |
Processamento histológico (etapas) | 1.Coleta do material 2.Fixação 3.Desmineralização 4.Desidratação 5.Diafanização 6.Impregnação por parafina 7.Inclusão definitiva 8.Toalete do bloco 9.Microtomia 10.Coleta do corte 11.Desparafinização 12.Hidratação 13.Coloração 14.Repetição das etapas 4 e 5 15.Montagem final |
Coleta do material (etapas) | 1.Aplicação da anestesia no animal 2.Retirada da peça anatômica 3.Lavagem da peça |
Fixação | -Imersão da peça anatômica em um líquido fixador para proteção e preservação do material como se “in vivo” |
Desmineralização/ Descalcificação | -Retirada de sais minerais da peça anatômica, pois estragam a navalha do micrótomo -Ocorre apenas em peças histológicas com concentração de sais |
Desidratação | -Lavagem da peça seguida de imersão em bateria crescente de álcool |
Diafanização | -Imersão em agente diafanizante (geralmente xilol) para retirada do álcool impregnado à peça |
Impregnação/ Embebição por parafina | -Imersão do material em parafina líquida em uma estufa apropriada -Também pode ser utilizado gelatina ou resina |
Inclusão definitiva | -Despejo da parafina líquida junto à peça anatômica em um molde apropriado -Solidificação da parafina à temperatura ambiente |
Toalete de bloco | -Aparamento do excesso de parafina seguido da fixação do bloco parafina-material a um suporte de madeira |
Microtomia | -Corte do bloco em fatias finas pelo aparelho micrótomo, obtendo-se cortes laminados do material anatômico -Banho em água quente para estiramento das fatias |
Coleta de cortes | -Retirada das fatias do banho-maria e colagem em lâminas de vidro |
Desparafinização | -Retirada da parafina impregnada à peça por banho em xilol |
Hidratação | -Imersão em bateria decrescente de álcool para retirada de xilol impregnado à peça, seguido de imersão em água destilada |
Coloração (etapas) | 1.Adição de corante hematoxilina 2.Lavagem em água corrente e água destilada 3.Adição de corante eosina 4.Lavagem novamente em água destilada |
Corantes | -Hematoxilina (corante básico) -Eosina (corante ácido) -Coloração ortocromática é aquela em que o tecido exibe a mesma cor do corante -Metacromática é aquela em que o tecido exibe cor diferente do corante |
Montagem final (etapas) | 1.Faz-se novamente desidratação e diafanização 2.Colagem da peça entre uma lamínula e lâmina de vidro 3.Uso do bálsamo do Canadá como cola 4.Preparação histológica finalizada |
Processamento histológico (tipos) | -Esmagamento -Dacalque/Imprint -Espalhamento -Esfregaço de sangue -Montagem total |
Esmagamento | 1.Coloca-se um pequeno fragmento do tecido entre a lâmina preparada e a lamínula 2.Faz-se uma pequena pressão com o polegar. -Método usado em casos de aderência baixa entre as células do tecido. |
Esmagamento (foto) |
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Decalque/Imprint | 1.Retirada de um um fragmento do órgão do animal 2.Lavagem para retirada do sangue restante 3.Pressiona-se o material sobre uma lâmina de vidro. -Obtêm-se um "carimbo" do núcleo celular, permitindo a identificação do DNA e de algumas células. |
Decalque/Imprint (foto) |
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Espalhamento | 1.Raspagem da superfície de membranas mucosas 2.Espalhamento do material sobre uma lâmina de vidro. -Obtêm-se células espalhadas e pouco íntegras. |
Espalhamento (foto) |
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Esfregaço de sangue | 1.Depósito de uma gota de sangue sobre uma lâmina 2.Com uma segunda lâmina à 45° desliza-se sobre a primeira -Obtêm-se células isoladas e uma preparação histológica fina |
Esfregaço de sangue (foto) |
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Montagem total | -Método que se baseia em coletar um material fino ou transparente o suficiente para que possa ser estudado no microscópio óptico -Obtêm-se células inteiras |
Montagem total (foto) |
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