Las sondas de ADN se marcan con diferentes
marcadores fluorescentes de colores para visualizar
una o más regiones específicas del genoma
Características:
Prueba rápida y sensible para la
detección de cambios
cromosómicos crípticos o sutiles
Detecta alteraciones
genéticas en poblaciones de
células que no se dividen
Selección de sondas FISH para uso en oncología
1) sondas de pintura de
cromosomas completos (WCP) para
descifrar las aberraciones
citogenéticas
2) sondas de secuencia repetitivas para
la enumeración de cromosomas.
3) sondas de identificador específico de
locus (LSI) para fusiones de genes,
deleciones de genes o duplicaciones .
Avances tecnológicos:
CGH, SKY, M-FISH, mBAND y aCGH.
Agregan colores a las bandas
convencionales
5 pasos:
1) pretratamiento de la muestra
2) desnaturalización de la sonda y muestra
3) hibridación de la sonda con las células diana o
metaphase spreads
4) lavado posterior a la hibridación
5) detección usando un microscopio de
epifluorescencia simple
Recursos Citogenéticos del Cáncer
Base de datos Mitelman de
aberraciones cromosómicas y fusiones
génicas en el cáncer
Casos de tumores, en los que se han
notificado aberraciones
citogenéticas, es de 64.319
El Atlas de Genética y Citogenética en
Oncología y Hematología
Base de datos dedicada a genes,
citogenéticas y entidades clínicas en cáncer
y enfermedades propensas al cáncer.
Nomenclatura citogenética
Términos definidos y convenciones de sintaxis que
minimizan la complejidad y añaden precisión al
proceso. Se basa en los informes del Sistema
Internacional de Nomenclatura Citogenética
Humana (ISCN)
Citogenética convencional
Análisis cromosómico
Detecta: anormalidades citogeneticas
clonales, en casos como leucemia.
Adquirida
*AML, MDS y trisomía 8
Heredada
Trisomía 21
5 pasos :
1) Cultivo celular
2) Cultivo de cromosomas en metafase
3) Preparación de cromosomas
4) Bandas y tinción, usando un protocolo especial
5) Análisis por microscopía óptica
Proporciona: visión general de todas las
aberraciones cromosómicas en una sola
célula tumoral.
Resultados impredecibles = no
existe una técnica garantizable
Resultado exitoso = establecer cultivos múltiples
para maximizar las posibilidades de obtener
divisiones óptimas de células malignas:
1) cosecha directa de células
de médula ósea
3) cultivo nocturno
con sincronización (bloqueando
en la fase S del ciclo celular)
Diagnóstico:
FISH, RT-PCR y Southern Blot.
2) cultivo durante la noche
Características:
Mecanismos que
generan anormalidades
cromosómicas
1) Ganancia neta y
pérdida de material
cromosómico
Genes relevantes
para el cáncer:
Oncogenes
Genes supresores
de tumores
Reordenamientos
cromosómicos
Una parte de un
cromosoma se separa y se
une a otro cromosoma.
Translocación
equilibrada
Los trozos de cromosomas se encuentran a
distancia, pero no se gana ni pierde material
genético en la célula