Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que
puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e
hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración
.La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química.
Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y
condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son
consistentes con la preservación de tejidos
. El más común es el reemplazamiento
gradual de agua con un solvente
orgánico por transferencia del tejido a
través de soluciones de concentraciones
crecientes (etanol, acetona)-referido
como una serie de deshidratación
graduada
La deshidratación resultante es vía un
mecanismo de flujo en masa en vez
de una reacción química. Estos
solventes pueden hidrolizar el agua
para formar etanol y acetna, sin
embargo, la energía y condiciones
requeridas para esta reacción no son
normales en las condiciones de
fijación y no son consistentes con la
preservación de tejidos
Un método menos común en
microscopía de campo claro es
una deshidratación rápida
utilizando un reactivo orgánico
(metil celosolve,
dimetoxipropano, trietil fosfato).
Durante la deshidratación rápida, el agua del
tejido es reemplazada rápidamente, sin el
daño por tensión superficial que puede ir
asociado con los alcoholes o la acetona. El
metil celosolve y dimetoxipropano tienen
regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto
permite que el solvente interactúe con los
lípidos de las membranas biológicas, sin
causar alteración
La mayoría de los solventes de deshidratación no
son también solventes de parafina; por tanto
incorporaremos varios pasos de intermediarios para
mover el tejido del agente deshidratante hasta la
parafina. Ejemplos de agentes intermedios son
Histo-Clear, xileno, isopropanol, y tert-butil alcolhol
(TBA).
El isopropanol es preferido cuando se usa la
técnica de micro ondas. El huso de
Histo-Clear extraerá un fino pegamento
amarillo que atrapará y destruirá las
muestras de tejidos. A 58ºC la extracción
puede ocurrir dentro de una semana.
Cuando infiltramos en plástico, no se
requiere un solvente intermediario
Es importante tener presente que los
pasos de la solución de deshidratación e
infiltración son solventes orgánicos. Por
tanto, cuando etiquetes las muestras de
tejidos usa pequeñas etiquetas de papel
escritos con lápiz y no con boli. Pon la
etiqueta en el vial con la muestra de
tejido. Los solventes orgánicos
disolverán el pegamento que está sobre
la etiqueta del vial y la tinta que usaste
mara marcar la etiqueta.