Cultivo de segmentos, órgãos e células de plantas.
Recipientes de vidro e em forma asséptica, com
soluções de sais, nutrientes e reguladores do
crescimento como meios de cultura.
Obtenção de plantas idênticas
(clonagem vegetal), órgãos isolados
ou células isoladas, idênticos o
genótipo gerador que apresente as
características desejáveis.
Totipotência
Anotações:
Regeneração é fundamentada na capacidade de proliferação das células vegetais
organizarem-se em tecidos e plantas completas.
Reguladores do crescimento
Promotores do
crescimento:
auxinas,
citocininas e
giberelinas
Inibidores do crescimento: ácido abscísico
Etileno
Anotações:
Liberação da latência, estimulação do crescimento e diferenciação dos brotos e raízes, é possível tenha relação na formação de raízes adventícias, estimulação da abscisão de folhas e frutos, estimulação na indução da floração, indução da feminidade nas flores dioicas, estimulação da apertura da flor, estimulação da senescência de folhas e flores, estimulação do amadurecimento dos frutos.
Brassinosteróides, poliaminas, ácido
jasmônico e ácido salicílico
Planejamento de um
laboratório
Assepsia
Sala de
lavagem
Sala de
preparação
de meios
Sala de
fluxos
Sala de
incubação:
Estoque
Viveiro
Anotações:
Onde acontece aclimatização das plantas. Este deve permitir uma luminosidade, umidade e temperatura controladas; o chão preferivelmente de concreto ou
qualquer material lavável; ar filtrado e sistema de exclusão de insetos; áreas de fertilização e preparação de solos; áreas para estoque de material.
Esterilização e assepsia
Autoclave
Anotações:
esterilização é o vapor úmido a alta temperatura e pressão.
Ar quente no fogão
Submerger em álcool e flameja no queimador
Lâmpada de luz UV
Soluções: álcool, hipoclorito de sódio ou de
cálcio, peróxido de hidrogênio, água de bromo,
nitrato de prata e cloreto de mercúrio.
Anotações:
Uma desinfestação comum é: 60 segundos em
álcool, enxaguar com agua destilada estéril, 10
minutos em hipoclorito de sódio (se adicionam
2 gotas de detergente comercial como agente
umectante), 3 enxagues em agua destilada
estéril e secado com papel secante estéril.
Meios de
cultura
SAIS
MINERAIS
COMPOSTOS ORGANICOS
Anotações:
Como fonte de carbono geralmente se usa sacarosa a concentração de 2% - 3% mas, para algumas aplicações especiais pode se utilizar a 5% - 12%. Se usa glucose com monocotiledôneas ou frutose e amido com outras espécies. Tiamina em cultivos de células. Composto com efeitos estimulantes é inositol. Carboidratos, vitaminas, aminoácidos, amidas, algumas purinas e pirimidinas, hexitoles e ácidos orgânicos. Outros são: sulfato de adenina, bases nitrogenadas, ácido cítrico, ácido málico.
MATERIAL INERTE DE SUPORTE: O ágar, poliacrilamida,
silicagel, polissacárido de ácido glucurónico “gelrite” (Bactérias
Género Sphingomonas sp. Pseudômonas elodea), amido de
diferentes cereais, polissacárido de xilose, arabidose e ácido
galacturónico “isubgol” (sementes de Plantago ovata),
algilatos do ácido algínico (algas Sp. Macrocrystis, Fucus e
Laminaria) e polímeros sintéticos “biogel P200”.
Para meio líquido se pode usar um suporte como fibra de vidro ou papel filtro.
COMPLEXOS NATURAIS :
Polpa de Banana da terra,
endosperma de coco, emulsão
de peixe, extrato de malta,
suco de laranja, caseína
hidrolisada ou hidrolisado
proteico, suco de tomate e
extrato de levedura.