PCR

Polymerase catalyzed reactivity

Prolongation chains of RNA

Polymerase chain reaction

Polymerising copy reaction

einer Forschungsgruppe von Prokaryoten in heißen thermatischen Quellen

Whatson and Crick in den 1950er Jahren

Kary Banks Mullis u. Michael Smith, sie erhielten 1993 den Nobelpreis für Chemie

eine Forschungsgruppe der DFG in den 1980ern

Finden bestimmter DNA Sequenzen

Restriktion von DNA, um die Abschnitte später weiter zu verarbeiten

Sequenzierung bestimmter DNA-Abschnitte

Vervielfältigen von definierten DNA-Abschnitten

Magnesiumchlorid

Polymerase

Nuklease-freie, physiologische Kochsalzlösung

Puffer mit passendem pH für Polymerase

Primer

DNTPs

Die DNA, die den zu amplifizierenden Abschnitt enthält.

Eine Art "Leerwert" ohne DNA.

Eine DNA-Leiter mit definierter Anzahl von Basenpaaren.

Eine Standard-Zielsequenz zur Kontrolle des korrekten PCR-Ablaufs.

Elongation - Denaturierung - Annealing

Denaturierung - Annealing - Elongation

Annealing - Elongation - Denaturierung

Denaturierung - Elongation - Annealing

Dabei lagern sich die Primer an bestimmte DNA-Einzelstrang-Abschnitte an.

Die Primer markieren den Startpunkt für die Polymerase.

Primer bestehen meist aus 20-30 Nukleotiden.

Primer werden " in vivo" durch Immunisierung von Versuchstieren hergestellt.

Primer werden auch als Oligo-Nukleotide bezeichnet.

Es sollten dünnwandige PCR-Tubes verwendet werden.

Vor dem Ablauf werden die Tubes mit den Ansätzen zentrifugiert.

Es werden 3 Wasserbäder benutzt.

Eine Deckelheizung ist sinnvoll.

Ein Thermocycler muss die Temperatur sehr schnell ändern können.