Electroforesis

Flussdiagrammknoten

• Electroforesis

• La técnica de separación de moléculas cargadas eléctricamente.

• Obtención de las muestras de ADN

• Preparación del gel de agarosa

• Preparación de las muestras con el buffer de carga

• Carga de las muestras

• Teñido del gel

• Corrida del gel

• Visualización del gel con la luz ultravioleta y análisis de resultados

• -En un tubo de microcentrífuga adicione 1 de marcador molecular (Hind III), 3 de tampon TEII y q de tampon colorante 6X -Llevar a baño María a 65º C por 10 min. -Transferir el tubo con la mezcla a hielo por 10min.

• -Pesar la agarosa para la concentración de 0.8% y adicionar tampón TAE IX. -Disolver la agarosa en baño maría hasta no observar grumos y que el color sea transparente. -Dejar enfriar y adicionar 5 desafe view green. -Preparar la bandeja de la cámara de electroforesis. -Dejar solidificar la agarosa.

• -Sobre el papel de parafina colocar 2 de azul de bromofeno y adicionar 5 de DNA. -Homogeneizar las muestras con cuidado y adicionar cada una en los pozos correspondientes.

• -Posicionar los electrodos en la cámara de electroforesis. -Encender la fuente de energía y seleccionar el voltaje y el tiempo de corrida. -Después de la corrida apagar la fuente y remover los electrodos. -Retirar el gel de agarosa de la cámara de electroforesis. -Visualizar los resultados en un transiluminador de luz ultravioleta.