Zusammenfassung der Ressource
COLORIMETRIA Y ESPECTROFOTOMETRIA
- La espectrofotometria se basa en la capacidad de las
sustancias químicas de absorber luz.
- Se puede utilizar 3 regiones del espectro electromagnético para evaluar el comportamiento espectrofotométrico de una
sustancia.
- Región ultravioleta UV
- Entre 200 a <380 nm
- Región de luz
VIS
- Entre 380 a <780 nm
- Región del infrarrojo IR
- 780 nm a <1000
mm
- Ecuación E=h..c/ λ
- h= Cosntante de Plank ( 6.62x 10^-27 erg/ s )
- c= Velocidad de la luz ( 3x 10^8 m/s)
- λ= Longitud de onda
- Transmitancia (T) de una solución se
define como la fracción de luz
incidente que es transmitida a través
de una muestra en solución.
- T= %T x
100
- A partir de la medición de la transmitancia es posible calcular:
- Absorbancia (
A)
- Densidad óptica
(DO)
- Extinción (E)
- La determinación de la concentración de una sustancia se basa en la ley de Beer- Lambert.
- Se describe la relación entre
- La absorbancia
(A)
- Concentración del absorbente
(C)
- Ancho de la celda (I)
- Equivale al trayecto recorrido por
la radiación que se utiliza.
- Relación directamente proporcional entre
absorbancia y concentración
- • La luz incidente debe ser
monocromática
- • La longitud de onda
utiliada debe coincidir
con la longitud donde
la sustancia presenta
su máxima absorción
- • El solvente no
debe interaccionar
con el absorbente
- • El absorbente no debe estar a
altas concentraciones.
- PRACTICA 1
- PROCEDIMIENTO
- 1. CALIBRACIÓN DEL
ESPECTROFOTÓMETRO CON
BLANCO DE AGUA
- 1. Verificar que el colorímetro este en
modo Transmitancia y que la longitud de
onda de inicio sea 400 nm
- 2. Ajustar el equipo a 0% T girando
suavemente la perilla izquierda
- 3. Preparar un tubo blanco con 5 ML de agua
destilada
- 3.1 Introducirlo en una celda y
cerrarla
- 3.2 Ajustar al 100% T con la perilla derecha
- 4. La calibración debe ser realizada
SIEMPRE que se seleccione una
nueva longitud de onda
- 2. CURVA ESPECTRAL DEL
KMNO4
- 1. En un tubo de vidrio agregar 5 ml de la solución de KMnO4 2.5 x 10^-4 M
- 2. Leer la absorbancia de la anterior solución cada 10 nm en el rango de
longitud de onda de 400 a 600 nm.
- Calibrar cada
vez que cambie
la longitud de
onda con
blanco de agua
- 3. Registrar datos en tabla 2 y hacer gráfica en papel milimetrado de
absorbancia vs longitud de onda.
- 4. Determinar a cual longitud de onda el KMnO4 presenta máxima absorbancia.
- 3. CURVA DE CALIBRACIÓN
KMNO4
- 1. A partir de la solución de KMnO4 2.5 x 10^-4 M
- 1.1 Preparar los
tubos del 1-5 de
acuerdo a la
indicaciones de la
tabla.
- 2. Seleccionar longitud de onda donde el
KMnO4 presento la máxima absorbancia y
calibre el colorímetro con el Blanco
- 3. Medir la absorbancia de las soluciones preparadas
previamente tubos de 1 a 5 y registrar en tabla
- 4. Medir la absorbancia de la solución marcada como
muestra problema y registrar en tabla.