Zusammenfassung der Ressource
Técnicas utilizadas
como INMUNOENSAYOS
- Diferencias
- ELISA utilizan como marcador
una enzima y el espectrofotómetro
como sistema de detección
- iImunofluorescencia utilizan como marcador un fluorocromo
y necesitan como sistema de detección el microscopio de
fluorescencia
- InmunoFluorencencia
- Técnica utilizada para visualizar la distribución de una
proteína o antígeno específico en células o secciones de
tejido utilizando la especificidad de los anticuerpos por su
antígeno para dirigir marcadores fluorescentes a las
biomoléculas dianas de forma específica.
- Esta dividida en
- IFDirenta
- Se usa unión covalente previa del fluoróforo con el
anticuerpo primario, sólo requiere una única etapa de
incubación con el antígeno y una sola etapa de lavado. El
marcador fluorescente generalmente produce una
sustancia colorada o un aumento en la cantidad de luz
emitida a una longitud de onda determinada, si el antígeno
está presente. En el caso de ausencia de antígeno, no hay
unión del anticuerpo primario marcado y por lo tanto no
hay señal.
- IFIndirecta
- Consiste en el uso de un anticuerpo primario no
marcado que se une específicamente al antígeno
diana, y el anticuerpo secundario, que lleva el
fluoróforo, reconoce el anticuerpo primario y se
une a él. Varios anticuerpos secundarios pueden
unirse al anticuerpo primario y esto proporciona
una amplificación de la señal mediante el
aumento del número de moléculas de marcadores
fluorescentes por antígeno.
- ELISA
- Ensayo inmunoenzimático ampliamente
empleado en el área médica para la
cuantificación de moléculas especialmente
de aquellas que experimentan cambios en
diferentes estados como pueden ser
infecciones por bacterias, virus, hongos o
parásitos o fases activas de enfermedades
autoinmunes.
- Divición
- Directa
- Fijación al soporte insoluble de
antígenos específicos. Lavado para eliminar los
antígenos fijados deficientemente o no fijados..
- Adición de anticuerpos marcados . Lavado para
eliminar los anticuerpos marcados que no hayan
reaccionado.
- Adición de substrato
- Indireta
- Fijación al soporte insoluble de
antígenos específicos para los
anticuerpos objeto de estudio
- Adición del suero problema, de tal forma que sus anticuerpos
reaccionarán específicamente con los antígenos fijados al soporte.
Lavado.
- Adición de anti-anticuerpos conjugados con una enzima