Zusammenfassung der Ressource
Cultivos celulares
- Un cultivo celular es el conjunto de
procedimientos que hacen posible el
mantenimientos células pluricelulares en un
ambiente controlado preservando al máximo
sus características fisiológicas, bioquímicas y
genéticas
- Tipos de cultivos celulares
- Cultivos de
explantes
- Consiste en pegar
un fragmento de
tejido a una
superficie y
nutrirlo con un
medio de cultivo
- Cultivos de
órganos
- Consiste en mantener un órgano
entero o parte de él con los
distintos tipos celulares presentes
diferenciados, así como la
estructura histológica y la
arquitectura del órgano
- Cultivos
de
células
- Se realiza a partir de suspensiones celulares que
se introducen en un recipiente adecuado junto
con un medio de cultivo y se incuban en las
condiciones óptimas para que las células crezcan
- Cultivo celular primario
- La suspensión celular de partida se obtiene
separando las células de un tejido por métodos
mecánicos o enzimáticos
- Cultivo celular secundario
- La suspensión celular se obtiene a partir d un
cultivo primario o de otro secundario,
mediante un subcultivo o "pase"
- Principales
aplicaciones
- Estudios de
citoxidad
- Estudios de
cardiogénesis
- Estudio de cualquier
aspecto relacioado
con el metabolismo
celular
- Estudios con
células
madre
- Virología
- Inmunología
- Producción
de fármacos
- Producción de tejidos y
órganos funcionales en un
ambiente controlado para su
uso en injertos y traspantes
- Estudios de
mutagénesis
- Factores que
intervienen en
el cultivo
- Soporte físico
- Materiales
empleados
- Tipos de
recipiente
- Placas multipocillo
- Placas de Petri
- Frascos roux
- Botellas para
incubadores tipo roller
- Tratamiento
de recipientes
- Medios de
cultivo
- Características
fisicoquímicas
de los medios
- pH
- Osmolaridad
- Viscosidad
- Tensión superficial
- Composición de
los medios de
cultivo
- Tampón
- Sales minerales
- Glucosa
- Aminácidos
- Suero animal
descompementado
- Suplementos orgánicos
de bajo peso moecular
- Indicador Ph
- Antibióticos y
antifúngicos
- Condiciones
de incubación
- Temperatura
- Humedad
- Atmósfera
gaseosa
- Procedimientos
de cultivo
celular
- 1) Disgregación celular
- 3) Recuento y viabilidad celular
- 2) Selección de células
- 4) Descongelación de células
- 5) Siembra del cultivo
- 6) Mantenimiento del cultivo
- 7) Conservación de células
- Contaminación
en los cultivos
- Crecimiento de los cultivos
- Formas de crecimiento
- En monocapa
- Consiste en que las células crecen pegadas sobre una
superficie sólida
- En la fase de latencia se van pegando al soporte
- En la fase exponencial proliferan formando COLONIAS CELULARES
- En a fase estacionaria entran en CONFLUENCIA, estableciendo contacto entre ellas lo
que produce INHIBICIÓN POR CONTACTO
- En suspensión
- Consiste en mantener células que no necesitan pegarse a una superficie para crecer,
dispersas en el interior del medio de cultivo y creciendo
- Curva de crecimiento
- Es a representación grafica de a concentración
de células por los días de cultivo en la que se
diferencian tres fases:
- Fase de latencia
- Corresponde a las primeras 24
horas de evolución del cultivo, en as
que no se produce crecimiento y el
número de células permanece
contstante o disminuye ligeramente
- Fase estacionaria
- Sucede a partir de los 6-7 días y es la fase
en la que el número de células permanece
constante
- Fase exponencial
- Dura aproximadamente 6-7 días y corresponde a la fase en la
que el número de células aumenta de manera exponencial
hasta alcanzar un máximo. Al final de esta fase es el mejor
momento para realizar subcultivos
- Líneas celuares
- Línea celular primaria
- Es aquella obtenida a partir de un CULTIVO PRIMARIO y que se mantiene en cultivo mediante pases seriados durante
un tiempo limintado
- Las líneas celulares primarias tienen una vida finita entre 20 y 100 pases y después
entran en la FASE DE SENESCENCIA en la que las células van perdiendo capacidad
dividirse y el cultivo acaba muriendo
- Línea celular continua
- Son aquellas que se obtiene a partir de un cultivo primario y se
mantiene en cultivo por tiempo ilimitado mediante pases
seriados
- Estas líneas celulares aparecen por la aparición de CÉLULAS IMORTALES, como
consecuencia de un FENÓMENO DE TRANSFORMACIÓN de las células normales,
que se puede inducir por:
- Métodos físicos
- Métodos químicos
- Métodos biológicos