nom -028

NMX-AA-028-SCFI-2001

• ANÁLISIS DE AGUA - DETERMINACIÓN DE LA DEMANDA
• BIOQUÍMICA DE OXÍGENO EN AGUAS NATURALES,
• RESIDUALES (DBO5) Y RESIDUALES TRATADAS - MÉTODO DE
• PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-028-1981)

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• 0. Introducción
• Demanda bioquímica de oxígeno (DBO5): Es una estimación de la cantidad de oxígeno
• que requiere una población microbiana heterogénea para oxidar la materia orgánica de
• una muestra de agua en un periodo de 5 días. El método se basa en medir el oxígeno
• consumido por una población microbiana en condiciones en las que se ha inhibido los
• procesos fotosintéticos de producción de oxígeno en condiciones que favorecen el
• desarrollo de los microorganismos.
• 1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN
• Esta norma mexicana establece el método de análisis para la determinación de la
• demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en aguas naturales, residuales y residuales
• tratadas.
• NOTA. Se determina la cantidad de oxígeno utilizada por una población
• microbiana heterogénea para transformar la materia orgánica, en un
• periodo de incubación de 5 días a 20ºC.
• 2 REFERENCIAS
• Para la correcta aplicación de esta norma se deben consultar las siguientes normas
• mexicanas vigentes o las que las sustituyan:
• NMX-AA-012 SCFI-2001 Análisis de agua - Determinación de oxígeno disuelto en
• aguas naturales, residuales y residuales tratadas -
• Método de prueba.
• NMX-AA-100-1987 Calidad del agua – Determinación de cloro total – Método
• iodométrico. Declaratoria de vigencia publicada en el
• Diairo Oficial de la Federación del 22 de junio de 1987.

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• 3 PRINCIPIO DEL MÉTODO
• El método se basa en medir la cantidad de oxígeno que requieren los
• microorganismos para efectuar la oxidación de la materia orgánica presente en aguas
• naturales y residuales y se determina por la diferencia entre el oxígeno disuelto inicial
• y el oxígeno disuelto al cabo de cinco días de incubación a 20°C.
• Para la determinación de oxígeno disuelto (OD) se puede emplear cualquiera de los
• dos métodos establecidos en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI (ver 2
• Referencias).
• 4 DEFINICIONES
• Para los propósitos de esta norma se establecen las siguientes definiciones:
• 4.1 Aguas naturales
• El agua cruda, subterránea y pluvial
• 4.2 Aguas residuales
• Las aguas de composición variada provenientes de las descargas de usos
• municipales, industriales, comerciales, de servicios, agrícolas, pecuarios, domésticos y
• en general de cualquier otro uso.
• 4.3 Biota
• Es un conjunto de organismos vivos tanto de origen vegetal como animal
• .
• 4.4 Bitácora
• Cuaderno de laboratorio debidamente foliado e identificado, en el cual los analistas
• anotan todos los datos de los procedimientos que siguen en el análisis de una
• muestra, así como todas las informaciones pertinentes y relevantes a su trabajo en el
• laboratorio.
• 4.5 Blanco analítico o de reactivos
• Agua reactivo o matriz equivalente que no contiene, por adición deliberada, la
• presencia de ningún analito o sustancia por determinar, pero que contiene los mismos
• disolventes, reactivos y se somete al mismo procedimiento analítico que la muestra
• problema.
• 4.6 Calibración
• Conjunto de operaciones que establecen, bajo condiciones específicas, la relación
• entre los valores de una magnitud indicados por un instrumento o sistema de
• medición, o los valores representados por una medida materializada y los valores
• correspondientes de la magnitud, realizados por los patrones, efectuando una
• corrección del instrumento de medición para llevarlo a las condiciones iniciales de
• funcionamiento.
• 4.7 Demanda bioquímica de oxígeno (DBO5)
• Es una estimación de la cantidad de oxígeno que requiere una población microbiana
• heterogénea para oxidar la materia orgánica de una muestra de agua en un periodo de
• 5 días.
• 4.8 Descarga
• Acción de verter, infiltrar o depositar o inyectar aguas residuales a un cuerpo receptor
• en forma continua, intermitente o fortuita, cuando éste es un bien del dominio público
• de la Nación.
• 4.9 Desviación estándar experimental
• Para una serie de n mediciones del mismo mensurando, es la magnitud s que
• caracteriza la dispersión de los resultados, dado por la siguiente fórmula:
• s
• x x
• n
• i
• i
• n
• =
• −
• −
• ∑=
• ( ) 2
• 1
• 1
• En donde xi es el resultado de la i-ésima medición y x es la media aritmética de los n
• resultados considerados.
• 4.10 Disolución estándar
• Disolución de concentración conocida preparada a partir de un patrón primario.
• 4.11 Disolución madre
• Corresponde a la disolución de máxima concentración en un análisis. Es a partir de
• esta disolución que se preparan las disoluciones de trabajo.

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• 4.12 Inóculo
• Es una suspensión de microorganismos vivos que se han adaptado para reproducirse
• en un medio específico.
• 4.13 Material de referencia
• Material o substancia en el cual uno o más valores de sus propiedades son
• suficientemente homogéneas y bien definidas, para ser utilizadas para la calibración
• de aparatos, la evaluación de un método de medición, o para asignar valores a los
• materiales.
• 4.14 Material de referencia certificado
• Material de referencia, acompañado de un certificado, en el cual uno o más valores de
• las propiedades están certificados por un procedimiento que establece la trazabilidad a
• una realización exacta de la unidad en la cual se expresan los valores de la propiedad,
• y en el que cada valor certificado se acompaña de una incertidumbre con un nivel
• declarado de confianza.
• 4.15 Medición
• Conjunto de operaciones que tiene por objeto determinar el valor de una magnitud.
• 4.16 Medio aerobio
• Es aquel en el cual se desarrollan microorganismos en presencia de oxígeno
• molecular.
• 4.17 Medio anaerobio
• Es aquel en el cual se desarrollan microorganismos en ausencia de oxígeno
• molecular.
• 4.18 Mensurando
• Magnitud particular sujeta a medición.
• 4.19 Muestra compuesta
• La que resulta de mezclar un número de muestras simples. Para conformar la muestra
• compuesta, el volumen de cada una de las muestras simples deberá ser proporcional
• al caudal de la descarga en el momento de su toma.
• 4.20 Muestra simple
• La que se tome en el punto de descarga, de manera continua, en día normal de
• operación que refleje cuantitativa y cualitativamente el o los procesos más
• representativos de las actividades que generan la descarga, durante el tiempo
• necesario para completar cuando menos, un volumen suficiente para que se lleven a
• cabo los análisis necesarios para conocer su composición, aforando el caudal
• descargado en el sitio y en el momento de muestreo.
• 4.21 Parámetro
• Variable que se utiliza como referencia para determinar la calidad física, química y
• biológica del agua.
• 4.22 Patrón (de medición)
• Medida materializada, aparato de medición o sistema de medición destinado a definir,
• realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o varios valores conocidos de una
• magnitud para transmitirlos por comparación a otros instrumentos de medición.
• 4.23 Patrón de referencia
• Patrón, en general de la más alta calidad metrológica disponible en un lugar dado, o
• en una organización determinada del cual se derivan las mediciones realizadas en
• dicho lugar.
• 4.24 Patrón de trabajo
• Patrón que es usado rutinariamente para calibrar o controlar las medidas
• materializadas, instrumentos de medición o los materiales de referencia.
• 4.25 Patrón nacional
• El patrón autorizado para obtener, fijar o contrastar el valor de otros patrones de la
• misma magnitud, que sirve de base para la fijación de los valores de todos los
• patrones de la magnitud dada.
• 4.26 Patrón primario
• Patrón que es designado o reconocido ampliamente como un patrón que tiene las más
• altas cualidades metrológicas y cuyo valor es aceptado sin referencia a otros patrones
• de la misma magnitud.
• 4.27 Patrón secundario
• Patrón cuyo valor es establecido por comparación con un patrón primario de la misma
• magnitud.

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• 4.28 Precisión
• Es el grado de concordancia entre resultados analíticos individuales cuando el
• procedimiento analítico se aplica repetidamente a diferentes alícuotas o porciones de
• una muestra homogénea. Usualmente se expresa en términos del intervalo de
• confianza o incertidumbre.
• 4.29 Trazabilidad
• Propiedad del resultado de una medición o del valor de un patrón por la cual pueda ser
• relacionado a referencias determinadas, generalmente patrones nacionales o
• internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo
• todas las incertidumbres determinadas.
• 4.30 Verificación de la calibración
• Una verificación periódica de que no han cambiado las condiciones del instrumento en
• una forma significativa.
• 5 REACTIVOS Y PATRONES
• Todos los productos químicos usados en este método deben ser grado reactivo, a
• menos que se indique otro grado.
• Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes características:
• a) Resistividad, megohm-cm a 25ºC: 0,2 min.;
• b) Conductividad, µS/cm a 25ºC: 5,0 máx.,
• y
• c) pH: 5,0 a 8,0.
• 5.1 Fosfato monobásico de potasio (KH2PO4)
• 5.2 Fosfato dibásico de potasio (K2HPO4)
• 5.3 Fosfato dibásico de sodio heptahidratado (Na2HPO4•7H2O)
• 5.4 Cloruro de amonio (NH4Cl)
• 5.5 Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4•7H2O)
• 5.6 Cloruro de calcio anhidro (CaCl2)
• 5.7 Cloruro férrico hexahidratado (FeCl3•6H2O)
• 5.8 Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4)
• 5.9 Hidróxido de sodio (NaOH)
• 5.10 Sulfito de sodio (Na2SO3)
• 5.11 2-cloro-6 (triclorometil) piridina
• 5.12 Glucosa grado patrón primario (C6H12O6)
• 5.13 Ácido glutámico grado patrón primario(C5H9NO4)
• 5.14 Ácido clorhídrico (HCl)
• 5.15 Acido nítrico (HNO3)
• 5.16 Disolución amortiguadora de fosfato. Pesar aproximadamente 8,5 g de
• fosfato monobásico de potasio (ver inciso 5.1), 21,75 g de fosfato dibásico
• de potasio (ver inciso 5.2), 33,4 g de sosfato dibásico de sodio
• heptahidratado (ver inciso 5.3) y 1,7 g de cloruro de amonio (ver inciso
• 5.4), disolver en 500 mL de agua y aforar a 1 L. El pH de la disolución debe
• ser de 7,2. Desechar el reactivo (o cualquiera de los siguientes reactivos)
• si hay algún signo de crecimiento biológico en el frasco de
• almacenamiento.
• 5.17 Disolución de sulfato de magnesio. Pesar aproximadamente 22,5 g de
• sulfato de magnesio heptahidratado (ver inciso 5.5), disolver en agua y
• diluir a 1 L.

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• 5.18 Disolución de cloruro de calcio. Pesar aproximadamente 27,5 g de cloruro
• de calcio anhídro (ver inciso 5.6), disolver en agua y diluir a 1 L.
• 5.19 Disolución de cloruro férrico. Pesar aproximadamente 0,25 g de cloruro
• férrico hexahidratado (ver inciso 5.7), disolver en agua y diluir a 1 L.
• 5.20 Disolución de ácido sulfúrico (0,1N). Agregar aproximadamente 2,8 mL de
• ácido sulfúrico concentrado (ver inciso 5.8) a 500 mL de agua, mezclar
• bien y diluir hasta 1 L
• .
• 5.21 Disolución de hidróxido de sodio (0,1N). Pesar aproximadamente 4,0 g de
• hidróxido de sodio (ver inciso 5.9), disolver en agua y diluir a 1 L.
• 5.22 Disolución de sulfito de sodio. Pesar aproximadamente 1,575 g de sulfito
• de sodio (ver inciso 5.10), disolver en agua y diluir a 1 L. Esta disolución no
• es estable; por lo que debe prepararse diariamente.
• 5.23 Disolución patrón de glucosa-ácido glutámico. Secar glucosa y ácido
• glutámico a 103ºC durante una hora. Pesar aproximadamente y con
• precisión 150,0 mg de glucosa (ver inciso 5.12) y 150,0 mg de ácido
• glutámico (ver inciso 5.13), diluir en agua y aforar a 1 L. Preparar
• inmediatamente antes de usarla. Esta disolución tiene una DBO5 de 198
• mg/L.
• 5.24 Disolución de cloruro de amonio. Pesar aproximadamente 1,15 g de
• cloruro de amonio (ver inciso 5.4) y disolver en 500 mL de agua, ajustar el
• pH a 7,2 con disolución de hidróxido de sodio (ver inciso 5.21) y aforar a
• 1 L. La disolución contiene 0,3 mg N/mL.
• 6 EQUIPO Y MATERIALES
• 6.1 Equipo
• 6.1.1 Equipo de aireación con difuso
• 6.1.2 Incubador: Controlado por termostato a 20ºC ± 1ºC. Eliminar toda la luz
• para evitar la posibilidad de producción fotosintética de oxígeno disuelto.
• 6.1.3 Balanza analítica con precisión de 0,1 mg
• 6.1.4 Medidor de oxígeno disuelto
• 6.2 Material
• Limpieza del material.
• 6.2.1 Todo el material usado en la determinación debe ser exclusivo para este
• procedimiento. Para el lavado del material remojar durante 1 h en una
• disolución de ácido sulfúrico al 10 % y enjuagar con agua. Los detergentes
• con base de amoniaco no deben usarse para la limpieza del material.
• 6.2.2 Los contenedores de las muestras deben lavarse con disolución de
• detergente no iónico, libre de metales, enjuagarse con agua, remojarse
• en ácido toda la noche y volver a enjuagarse con agua libre de metales.
• 6.2.3 Para el material de cuarzo, politetrafloroetileno o material de vidrio debe
• dejarse remojando de 12 h a 24 h con HNO3 (1:1), HCl (1:1) o con agua
• regia (3 partes de HCl concentrado + 1 parte de HNO3 concentrado) a
• 70o
• C solo en los casos que presente material adherido, después debe ser
• enjuagado con agua libre de metales.
• 6.2.4 En los casos de que el material presente grasas, enjuagar con acetona y/o
• hexano.
• 6.2.5 Botellas Winkler de vidrio para incubación con capacidad de 300 mL de
• aforo total y con boca estrecha, reborde y tapón de vidrio esmerilado, de
• forma cónica.
• 6.2.6 Contratapa de politetrafloroetileno u otro material plástico para botella
• Winkler
• 6.2.7 Bureta

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• 10 PROCEDIMIENTO
• 10.1 Preparación de agua para dilución
• 10.2.1 Utilizar este procedimiento como una comprobación aproximada de la
• calidad del agua de dilución. Si la disminución de oxígeno disuelto del agua
• excede de 0,2 mg/L, obtener agua de mejor calidad mejorando la
• purificación o usar agua de otra fuente. Alternativamente si se requiere
• inhibir la nitrificación, almacenar el agua de dilución sembrada en una
• habitación oscura a temperatura ambiente hasta que la captación de
• oxígeno disuelto se haya reducido lo suficiente para cumplir los criterios de
• comprobación del agua de dilución. No se recomienda su almacenamiento
• cuando la DBO5 se va a determinar sin inhibir la nitrificación ya que
• pueden desarrollarse microorganismos nitrificantes durante ese tiempo. Si
• el agua de dilución no ha sido almacenada para mejorar su calidad, añadir
• suficiente inóculo como para un consumo de OD de 0,05 mg/L a 0,1 mg/L
• en cinco días a 20°C. Al Incubar en un frasco Winkler lleno de agua de
• dilución durante cinco días a 20°C, el consumo no debe ser mayor a 0,2
• mg/L y preferiblemente no menor a 0,1 mg/L.
• 10.3 Control de la glucosa-ácido glutámico
• Comprobar en cada lote analítico la calidad del agua de dilución, la efectividad
• del inóculo y la técnica analítica mediante determinaciones de la DBO5 en muestras
• estándar de concentración conocida. Utilizar la disolución de glucosa-ácido
• glutámico (ver inciso 5.23) como disolución madre de control. La glucosa tiene una
• tasa excepcionalmente alta y variable de oxidación, pero cuando se utiliza con ácido
• glutámico, dicha tasa se estabiliza y es similar a la obtenida en muchas aguas
• residuales municipales. Alternativamente, si un agua residual particular contiene un
• componente principal identificable que contribuya a la DBO5, utilizar este compuesto
• en lugar de la glucosa-ácido glutámico. Determinar la DBO5 de una disolución al 2 %
• de la disolución de control patrón de glucosa-ácido glutámico utilizando las técnicas 10.2.1 Utilizar este procedimiento como una comprobación aproximada de la
• calidad del agua de dilución. Si la disminución de oxígeno disuelto del agua
• excede de 0,2 mg/L, obtener agua de mejor calidad mejorando la
• purificación o usar agua de otra fuente. Alternativamente si se requiere
• inhibir la nitrificación, almacenar el agua de dilución sembrada en una
• habitación oscura a temperatura ambiente hasta que la captación de
• oxígeno disuelto se haya reducido lo suficiente para cumplir los criterios de
• comprobación del agua de dilución. No se recomienda su almacenamiento
• cuando la DBO5 se va a determinar sin inhibir la nitrificación ya que
• pueden desarrollarse microorganismos nitrificantes durante ese tiempo. Si
• el agua de dilución no ha sido almacenada para mejorar su calidad, añadir
• suficiente inóculo como para un consumo de OD de 0,05 mg/L a 0,1 mg/L
• en cinco días a 20°C. Al Incubar en un frasco Winkler lleno de agua de
• dilución durante cinco días a 20°C, el consumo no debe ser mayor a 0,2
• mg/L y preferiblemente no menor a 0,1 mg/L.
• 10.3 Control de la glucosa-ácido glutámico
• Comprobar en cada lote analítico la calidad del agua de dilución, la efectividad
• del inóculo y la técnica analítica mediante determinaciones de la DBO5 en muestras
• estándar de concentración conocida. Utilizar la disolución de glucosa-ácido
• glutámico (ver inciso 5.23) como disolución madre de control. La glucosa tiene una
• tasa excepcionalmente alta y variable de oxidación, pero cuando se utiliza con ácido
• glutámico, dicha tasa se estabiliza y es similar a la obtenida en muchas aguas
• residuales municipales. Alternativamente, si un agua residual particular contiene un
• componente principal identificable que contribuya a la DBO5, utilizar este compuesto
• en lugar de la glucosa-ácido glutámico. Determinar la DBO5 de una disolución al 2 %
• de la disolución de control patrón de glucosa-ácido glutámico utilizando las técnicas .
• 10.4.1 Fuente de la siembra
• 10.4.1.1 Es necesario contar con una población de microorganismos capaces de
• oxidar la materia orgánica biodegradable de la muestra. El agua residual
• doméstica, los efluentes no clorados o sin desinfección, los efluentes de
• las plantas de tratamiento de desechos biológicos y las aguas superficiales
• que reciben las descargas de aguas residuales que contienen poblaciones
• microbianas satisfactorias. Algunas muestras no contienen una población
• microbiana suficiente (por ejemplo, algunos residuos industriales no
• tratados, residuos desinfectados, residuos de alta temperatura o con
• valores de pH extremos).
• Para tales residuos, sembrar el agua de dilución añadiendo una población de
• microorganismos. La mejor siembra es la que proviene del efluente de un sistema de
• tratamiento biológico de aguas residuales. Cuando se usa como siembra el efluente de
• tratamiento biológico de sistema de aguas residuales se recomienda la inhibición de la
• nitrificación. Cuando no se disponga de ésta, utilizar el sobrenadante del agua residual
• doméstica después de dejarlo reposar a temperatura ambiente durante al menos 1 h,
• pero no más de 36 h. Determinar si la población existente es satisfactoria haciendo la
• prueba de la siembra en una muestra para DBO5. El incremento del valor de la DBO5
• indica una siembra exitosa.
• 10.5 Control del inóculo
• Determinar la DBO5 del material de siembra como para cualquier otra muestra. Esto es
• una siembra control. A partir de este valor y de uno conocido de la dilución del material
• de siembra (en el agua de dilución) determinar el consumo de OD de la siembra. Lo
• ideal es hacer disoluciones tales de la siembra que la mayor cantidad de los
• resultados presenten una disminución de al menos el 50 % del OD. La representación
• de la disminución del OD (mg/L) con respecto a los mililitros de siembra, tiene que ser
• una línea recta cuya pendiente corresponde a la disminución de OD por mililitro del
• inóculo. La intersección del eje de las abscisas (OD) representa el consumo del
• oxígeno causado por el agua de dilución y debe ser inferior a 0,1 mg/L (ver inciso
• 10.8). Para determinar el consumo de OD de una muestra, se resta el consumo de OD
• de la siembra, del consumo de OD total. La captación de OD total del agua de dilución
• sembrada debe oscilar entre 0,6 mg/L y 1,0 mg/L.
• 10.6 Pretratamiento de la muestra
• 10.6.1 Muestras con pH ácidos o básicos
• 10.6.1.1 Neutralizar las muestras a un pH entre 6,5 y 7,5 con ácido sulfúrico o
• hidróxido de sodio de concentración tal que la cantidad de reactivo no
• diluya la muestra en más del 0,5 %. El pH del agua de dilución sembrada
• no debe verse afectado por la dilución de la muestra.

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• 10.6.2 Muestras que contienen cloro residual
• 10.6.2.1 Si es posible, evitar las muestras que contengan cloro residual, tomándolas
• antes del proceso de cloración. Si la muestra ha sido clorada pero no hay
• residuo detectable de cloro, sembrar el agua de dilución. Si hay cloro
• residual, eliminar el cloro de la muestra y sembrar con inóculo (ver inciso
• 10.4). No se deben analizar las muestras cloradas sin sembrar el agua de
• dilución. En algunas muestras, el cloro desaparece en el lapso de 1 h a 2 h
• después de su exposición a la luz. Esto suele ocurrir durante el transporte
• o la manipulación de la muestra. Para las muestras en las que el residuo
• de cloro no se disipe en un tiempo razonablemente corto, eliminar el cloro
• residual añadiendo disolución de sulfito de sodio.
• Determinar el volumen requerido de disolución de sulfito de sodio cuantificando el
• cloro residual total. Añadir a la muestra neutralizada el volumen relativo de la
• disolución de sulfito de sodio determinada por la prueba anterior, mezclar y después
• de 10 min a 20 min, comprobar el cloro residual de la muestra.
• 10.6.2.2 La determinación de cloro residual se realiza de acuerdo a lo establecido
• en la norma mexicana NMX-AA-100 (ver 2 Referencias).
• 10.6.3 Muestras sobresaturadas con OD
• 10.6.3.1 En aguas frías o en aguas donde se produce la fotosíntesis (aguas de
• embalses), es posible encontrar muestras que contienen más de 9,0 mg
• OD/L a 20ºC. Para evitar la pérdida de oxígeno durante la incubación de
• tales muestras, reducir el OD por saturación, calentando la muestra
• aproximadamente a 20°C en frascos parcialmente llenos mientras se
• agitan con fuerza o se airean con aire limpio, filtrado y comprimido.
• 10.6.4 Ajustar la temperatura de la muestra a 20°C ± 1°C antes de hacer
• diluciones.
• 10.6.5 Inhibición de la nitrificación
• 10.6.5.1 Si se requiere inhibir la nitrificación adicionar 3,0 mg de 2-cloro-6
• (triclorometil) piridina (ver inciso 5.11) a cada uno de los frascos antes de
• recolectar o bien adicionar la cantidad suficiente de agua para tener una
• concentración de 10 mg/L aproximadamente
• 10.6.5.2 Entre las muestras que requieren inhibición de la nitrificación se incluyen,
• los efluentes tratados biológicamente, las muestras sembradas con
• efluentes tratados biológicamente y las aguas superficiales entre otras.
• Debe hacerse la observación del uso de inhibición del nitrógeno cuando se
• presente el informe de los resultados.
• 10.7 Técnica de dilución
• 10.7.1 Las diluciones que dan lugar a un OD residual mayor de 1 mg/L y una
• captación de OD de al menos 2 mg/L después de 5 días de incubación, .
• 10.7 Técnica de dilución
• 10.7.1 Las diluciones que dan lugar a un OD residual mayor de 1 mg/L y una
• captación de OD de al menos 2 mg/L después de 5 días de incubación, producen los resultados más confiables. Hacer varias diluciones (al menos
• 3) por duplicado de la muestra preparada para obtener una captación de
• OD en dicho intervalo. La experimentación con una muestra concreta
• permite el uso de un número menor de diluciones. Un análisis más rápido
• tal como la DQO, presenta una correlación aproximada con la DBO5 y sirve
• como una guía para seleccionar las diluciones. En ausencia de datos
• previos, utilizar las siguientes diluciones: de 0 % a 1 % para los residuos
• industriales fuertes, de 1 % a 5 % para las aguas residuales sedimentadas
• y crudas, del 5 % al 25 % para el efluente tratado biológicamente y del 25
• % al 100 % para las aguas superficiales contaminadas.

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• 10.8 Determinación del OD inicial
• 10.8.1 Método yodométrico
• La determinación del OD inicial se realiza por medio del método yodométrico de azida
• modificado, de acuerdo a lo establecido en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI (ver
• 2 Referencias).
• 10.8.2 Método electrométrico
• La determinación del OD inicial se realiza por medio del método electrométrico
• con electrodo de membrana, de acuerdo a lo establecido en la norma mexicana NMXAA-012-SCFI
• (ver 2 Referencias). Los aceites, grasas o cualquier sustancia que se
• adhiera a la membrana puede ser causa de baja respuesta en el electrodo.
• 10.9 Blanco del agua de dilución. Emplear un blanco del agua de dilución como
• un control aproximado de la calidad del agua de dilución no sembrada y de
• la limpieza de los frascos de incubación. Junto con cada lote de muestras,
• incubar un frasco de agua de dilución no sembrada. Determinar el OD
• inicial y final como se especifica en los incisos 10.7 y 10.10. El consumo de
• OD no debe ser mayor de 0,2 mg/L y preferentemente no menor a 0,1 .
• 10.10 Incubación
• Incubar a 20ºC ± 1ºC las botellas de DBO5 que contengan las muestras con las
• diluciones deseadas, los controles de siembra, los blancos de agua de dilución y el
• control de glucosa-ácido glutámico. En caso de no contar con contratapas, diariamente
• se debe verificar que el sello hidraúlico esté intacto en cada botella incubada, agregar
• agua si es necesario.
• 10.11 Determinación del OD final
• Después de 5 días de incubación determinar el OD en las diluciones de la muestra, en
• los controles y en los blancos. La medición del OD debe ser realizada inmediatamente
• después de destapar la botella de Winkler, para evitar la absorción de oxígeno del aire
• por la muestra.

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• 11 CÁLCULOS
• 11.1 Calcular la DBO5
• 11.1.1 Cuando no se utilice inóculo ni diluciones:
• DBO5 (mg/L) = ODi mg/L - OD5 mg/L
• 11.2 Cuando se utiliza inóculo
• 11.2.1 Sin dilución:
• DBO5 (m/L)= (ODi mg/L - OD5 mg/ L) - C1 (B1 - B2 ) (Vt )
• C2(Vm)
• 11.2.2 Con dilución:
• DBO5 (m/L)=[ (ODi mg/L - OD5 mg/ L) - C1 (B1 - B2 ) (Vt )]
• C2(Vm) P