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Description
Flashcards by faizia basharat, updated more than 1 year ago
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Created by faizia basharat
over 6 years ago
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| Question | Answer |
| comment appelle t on l'étude des tissus anormaux? | anatomie pathologique |
| le tissus comprend 2 constituants principaux qui sont ? | cellules + MEC |
| definition de la cellule | unité fondamentale de la vie capable de subsister a d'état autonome et parfois de se reproduire |
| les cellules différenciées sont des cellules ayant acquis 3 types de caractéristiques ….? | 1. caractéristique morphologique 2. caractéristique moléculaire 3. caractéristique fonctionnelle |
| ces cellules différenciées acquissent leurs caractéristiques morphologiques, moléculaires, et fonctionnelles en rapport avec quoi? | en rapport avec un role physiologique spécifique |
| les cellules en différenciations terminales = ? | cellules différenciée et incapable de se diviser |
| eg des cellules en différenciation terminales | globule rouge, neurone, cellule épithéliale caliciforme, etc |
| cellules indifférenciées=? | cellule dont les caractéristiques morphologiques, moléculaires et/ou fonctionnelles ne permettent pas de prédire de fonction spécifique |
| eg de cellule indifférenciée | cellule souche |
| organe =? | entité anatomique macroscopique comportant plusieurs variétés de tissus |
| viscère=? | organe logé dans une des cavités (thorax, abdomen) de l'organisme |
| eg de viscères creux | Coeur, estomac, intestin, ….. |
| eg de viscères pleins | foie, rate, …. |
| système =? | ensemble de tissus et/ou d'organe définissant des connexions anatomiques, hormonales, ou fonctionnelles |
| eg de système | SNC, système digestif, système endocrinien diffus, système immunitaire |
| la limite de resolution de l'oeil nu? | 0,2 mm |
| la taille des majorités des cellules se trouvent entre quels nombres | 0,2 mm a 1 microm |
| limite de resolution du MO | 0,2 microm |
| la taille des majorités des organites cellulaires est entre quels nombres? | 1 microm a 0,1 nm |
| limite de resolution au ME | 0,2 nm |
| Donnez 3 façons de prélèvements de cellules? | 1. par frottis 2. par brossage 3. par ponction |
| donnez 3 façons de prélèvements de tissus | 1. par biopsie 2. par endoscopie 3. par chirurgie |
| expliquez le terme d'un prélèvement par exérèse | ablation totale ou partielle d'un organe |
| expliquez le terme d'un prélèvement par biopsie | prélèvement d'un petit fragment d'organe pour analyse |
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| 3 roles du fixateur | 1. immobilise les constituants tissulaires/cellulaires et les rend stable 2. previent la decomposition post mortem 3. permet la technique histologique et les colorations ulterieurs |
| le mecanisme d'action de la fixation peut comporter quoi? | precipitation, polymerisation, coagulation de proteins, sucres ou lipides |
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| inconvenience du AFAA | AN fragmentés |
| pour choisir quel fixateur utiliser il faut balancer les avantages et inconveniences par apport a quoi? | 1. morphologie 2. immunohistochimie 3. etudes moleculaires (ADN/ARN) |
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| quels sont les étapes a suivre après fixation pour preparer le tissus pour une etude histologiques | 1. decalcification si prélèvement calcifié 2. inclusion 3. coupe 4. coloration 5. observation - interpretation |
| pourquoi on decalcifie? | pour permettre ulterieurement la coupe |
| 1. principe de la decalcification ? 2. elle peut être accélérer comment? | 1. tampon chélateur du Ca2+ type EDTA 2. la chaleur, l'electrolyse |
| quel est le but de l'inclusion ? | donner la piece une consistance ferme et pour permettre la coupe |
| quel est le milieu d'inclusion utiliser et fond a quel temp? | PARAFFINE fond a 56c |
| quels sont les 3 étapes de l'inclusion? | 1. automates 2. enrobage 3. refroidissement et demoulage |
| quels sont les 3 étapes de l'automates | 1. DESHYDRATATION bains d'alcools successifs pour éliminer le fixateur 2. CLARIFICATION bains de toluene ou de xylene pour éliminer l'éthanol 3. IMPREGNATION bains de paraffine liquide(57c) pour impregnation du tissus par la paraffine |
| l'enrobage est un étape manuelle ou automatique? on fait quoi dans cette étape | un étape manuelle. on met le paraffin liquide dans un cupule métallique + la piece d'intérêt |
| quel appareil est utilisé pour couper ? | un microtome |
| 1 tour du manivelle nous donne 1 coupe d'épaisseur? | 3 a 5 micro |
| après la coupe après le microtome quel sont les étapes suivant? | 1.etalement dans bain marie a 37c 2.recuperation sur lame de verre 3.sechage sur platine chauffante |
| est ce que les tissus ont une coloration naturelle? | non sauf des pigments tels que la mélanine, hémosidérine (fer), lipofuscines et des pigments exogènes comme les tatouages |
| quels sont les étapes de la coloration | 1. déparaffinage 2. re-hydratation 3. colorants 4. de-hydratation 5. montage |
| principe du déparaffinage | bains de toluene ou xylene |
| re-hydratation? | bains d'alcool de moins en moins concentré |
| l'étape de colorants | ex: HES 1. bain d'hématéine 2. eau 3. bain d'éosine 4. eau 5. bain de safran 6. eau |
| l'étape de de-hydratation | bains d'alcool de plus en plus concentrer |
| l'étape de montage | lamelle horizontale, temp ambiante, colle |
| grossissement du MO ? | entre x2 et x1500 |
| en MO est ce que l'identification est possible pour 1. c. eukaryotes? 2. noyaux? 3. mitochondries? 4. bactéries? 5. elements de la MEC | 1. oui 2. oui 3. non 4. certaines apres coloration 5. certains apres coloration |
| chaque elements de la coloration standard HES se fixe sur quoi? |
1. hemateine: basique: AN
2. eosine: acidique: proteines
3. safran: collagene
Image:
Hes (binary/octet-stream)
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| quels sont les étapes a suivre pour preparer un tissus congelé pour une etude histologique | 1. coupes de tissus congelé a -80c ou inf. 2. réchauffement a -20 a -30c et enrobage dans colle OCT 3. coupe au cryostat a -20 a -30c 4. séchage 5. fixation (ethanol ou acetone) 6. coloration (HE) 7. montage |
| pq la congelation aide au diagnostic pour un examen extemporané? | urgence du resultant nécessité par le chirurgien |
| comment la congelation est meilleur pour le diagnostic comparer au tissus directement fixé?. | permet: -recherche d'accumulation lipidiques -histochimie -immunohistochimie -extraction d'ARN et d'ADN. |
| pq congeler et archiver des échantillons congelés? | 1. a visée sanitaire 2. pour interface avec recherche |
| cytospin? | conc. de liquide peu cellulaire |
| pour une apposition et cytologie, quels sont les fixateurs rapides utiliser? | ethanol methanol acetone laque |
| l'inclusion est il necessaire? | NON mais possibilite de realiser un culot cellulaire pour liquide puis d'inclusion du culot en paraffine |
| la congelation est elle possible? | oui |
| pour la coloration, des bains de toluene ou de xylene sont il pre recquis? | non |
| quels sont les autres procedures applicable sur une apposition pour une etude cytologique? | 1. coloration speciales 2. techniques histo-enzymatiques (avant fixation) 3. immunocytochimie 4. FISH sur noyaux interphasiques |
| pour une cytologie vaginale quel coloration est utiliser? | coloration de papanicolaou |
| pour une cytologie vaginale quel est la couleur du : 1. noyaux 2. cytoplasme des c. profondes 3. cytoplasme des c. superficielles | 1. bleu 2. bleu 3. rose |
| chez une femme ménopausée on voit quoi sur une cytologie vaginale? | l'absence de cellules superficielles |
| la coloration MGG | hematologie |
| comment peut on prelever des cellules pour une hematologie? | 1. frottis sanguin 2. aspiration et apposition de la moelle 3. ponction de liquide inflammatoire 4. coupe d'organes lymphoides ou hematologique (BOM) |
| coloration MGG donne quel couleur pour cellule : 1. basophile 2. eosinophile 3. neutrophile 4. azurophile | 1. bleu 2. orange 3. beige-rose 4. pourpre |
| la coloration bleu de cresyl permet elle une cytologie vitale ? | oui (avant fixation) |
| Bleu de cresyl est utiliser pour identifier quel sorte de cellule? | les reticulocytes dans le sang |
| comment la microscopie a contraste de phase est differente? | en revelant les differences de phase de lumiere apres sa traverser de l'echantillon: differences d'indice de refraction |
| c'est quoi l'interet de ce microscope? | etude de cellules vivantes (non fixées) sur boite de culture ou lames |
| quels sont les applications cliniques? | 1. recherche d'anomalies de la mobilite ciliaire 2. tests de mobilite des spermatozoides |
| application recherche? | etudes de la mobilite des cellules |
| grossissement du MET ? | x500 a x200 000 |
| on peut identifier quoi comparer au MO? | organites, systemes de jonctions, myeline, elements de la MEC |
| quels sont les etapes d'une preparation pour etudes en MET? | 1. fixation 2. inclusion 3. coupe 4. coloration (optionelle pour contraste) |
| l'incovenience du MET | 1. cellule mort 2. seule une tres petite surface peut etre etudier |
| les etapes de la fixation ? | immersion dans fixateurs: 1. glutaraldehyde (plusieurs bains, 1h total) 2. puis tetroxide d'osmium (acide osmique) |
| inclusion? | resine epoxy |
| pour une etude avec un MO quel est la facon de proceder? | 1. coupes semi fines de 1micro des blocs de resine avec une ultramicrotome dont le rasoir est une lame de verre 2. la coloration utiliser est le bleu de toluidine 3. puis montage sur lame de verre 4. verification du materiel 5. reperage/selection |
| coloration bleu de toluidine -verification du materiel -reperage | |
| l'utra microtome utilie quoi comme rasoir pour une etude cytologique en MET? | diamant |
| les coupes ultra fines mesurent combien? | 50nm-0,5micro |
| recuperation se fait sur quoi? | la grille |
| pour du contraste qui est optionelle on utilise quoi comme coloration? | sels de plomb et d'uranium |
| acide osmique se fixe sur des substances osmiophiles pour contraste. Donnez eg | lipides insaturés la myéline |
| le MET est utiliser pour etudier des? | coupes |
| le MEB est utiliser pour étudier ? | des reliefs de surface |
| le MEB apres cryofracture | des reliefs et jonctions cellulaires |
| les colorations simples peuvent etre appliquer sur ? | -coupe paraffine -coupe congelation -lame de cytologie |
| contre une coloration IHC, on peut utiliser l'hématéine seule pour ? | une morphologie globale image |
| MGG? | hematologie |
| trichrome de masson pour ? | mise en evidence du tissus conjonctif (collagene de type 1 en vert) |
| pour identifier des fibres elastiques on peut utiliser quoi comme coloration? | orceine |
| utilisation du bleu de toluidine? | -pour une morphologie globale -coloration bleu pour reperage avant ME avec des coupes semi-fines |
| a cause d'une métachromasie qu'est ce qui se passe au bleu de toluidine? | transformation du bleu au rouge en presence de mastocytes et polynucléaires basophiles |
| pour identifier certaines cellules endocrines quels sont les métaux lourds qu'on peut s'en servir? | l'argent (grimelius, fontana) sels de chrome |
| pour coloration de la reticuline et neurones et prolongements neuronaux quels sont les métaux lourds qu'on peut servir? (image=reticuline) | l'or l'argent (image =prolongements neuronaux) |
| les colorations pour mettre en evidence le RER |
bleu de methylene
méthode de Nissl
violet crésyl
(application: neurohistologie)
Image:
Rer (binary/octet-stream)
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| qu'est qui ne peut pas être étudier sur coloration HES | les polysaccharides et mucines |
| du coup on utilise quoi comme colorant? | PAS PAS diastase |
| grace a la rxn de Schiff a l'acide periodique (PAS)on a une couleur pourpre/magenta pour ? | -mucines -glycogène -lame basale -glycosaminoglycanes -protéoglycanes |
| quel est l'action du PAS et PAS diastase sur une coupe? | Une action de l'amylase va permettre d'identifier du glycogène sur coupe consecutives avec PAS+ mais PAS diastase- |
| bleu de alcian peut être utiliser pour ? | -certaines mucines (acides) -certaines glycosaminoglycanes (cartilage) |
| pour la detection de l'accumulation de certaines substances on utilise des colorants spéciales. Donnez des eg | -coloration de Perls pour la detection du fer (image hémochromatose) - autres colorations : cuivre (maladie de Wilson) calcium (methode de von kossa) pigments billiaires |
| il y a des colorations spéciales pour la detection d'agents infectieux. donnez des eg pour detection des bactéries et champignons |
bactéries:
- coloration GRAM
-coloration Ziehl
-coloration de Whartin-starry
champignons:
-coloration de Grocott
Image:
Ziehl (binary/octet-stream)
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| pour mettre en evidence des inclusions lipidiques faut colorer comment ? | par diffusion d'huiles |
| donnez des eg | Soudan IV - rouge O red oil - rouge Noir Soudan |
| pq on peut utiliser ces colorants uniquement a partir de tissus/cellules frais ou congelés? | car les inclusions lipidiques disparaissent après traitement par le toluene |
| pour mettre en evidence une activite enzymatique intreseque on peut le faire uniquement a partir de …? | de tissus frais ou congeler |
| quels est l'application des enzymes suivants? 1. tyrosinase (dopa rxn) | 1. melanocytes |
| 2. phosphatase acide | lysosomes |
| 3. peroxydase et esterase | typage leucocytaires |
| 4. succinate deshydrogenase | 4. typage fibres |
| 5. ATPase | 5. application musculaires squelettiques |
| pour un typage des hemopathies sur frottis sanguin, je peux appliquer quels 2 sortes d'enzyme | 1. peroxydase 2. esterase |
| identifier l'image | peroxydase: lignee granuleuse |
| identifier l'image | esterase monocytaires |
| pour typage de rhabdomyocytes on peut utiliser quels sortes d'enzymes? | |
| pour une technique histoenzymatique on peut appliquer en recherche les enzymes comme traceur de population cellulaire. Donnez un eg |
Image:
Xgal (binary/octet-stream)
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| quel est l'interet de l'immunohistochimie et immunocytochimie? | reperer des antigenes (proteins le plus souvent) d'interet au niveau cellulaire ou extracellulaire a l'aide d'anticorps specifiques |
| antigene? | molecule capable d'activer le systeme immunitaire et de conduire a la production d'anticorps |
| anticorps? | glycoproteine secrete par les plasmocytes capable de se lier specifiquement a l'antigene |
| epitope? | site de l'antigene où se fixe l'anticorps |
| antigene - anticorps |
Image:
Ag Ac (binary/octet-stream)
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| principes IHC | 1. exploiter la reponse immunitaire de diverses especes pour produire des Ac specifiques 2. realiser la liaison Ag-Ac 'in vitro' 3. detecter (visualiser) le complexe Ag-Ac |
| un Ag possede en general combien d'epitopes? |
plusieurs
Image:
Ag (binary/octet-stream)
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| En fonction de la configuration de l'Ag, un epitope peut ne pas etre accessible a l'Ac. Vrai ou faux | vrai |
| est ce que plusieurs Ac peuvent se lier a un meme epitope avec une meme affinite? | non avec des affinites differentes |
| un meme epitope peut il se trouver sur de diff ag? | oui |
| quels sont les difficultes de l'IHC | disposer d'un bon Ac specifiques et pouvant atteindre son epitope sur coupe |
| 2 types d'Ac utiliser pour IHC | 1. Ac polyclonaux 2. Ac monoclonaux |
| LES AC POLYCLONAUX: 1. la generation de ce dernier se fait comment? | 1. par immunisation avec des injections successives par eg a un lapin jusqu'a sacrifice pour collecter le serum |
| le serum contient quoi? | contient un cocktail d'Ac diff dirigees contre diff epitopes avec des affinites diff. |
| 2. avantages? | simple peu couteux |
| 3. Inconvenients? | 1. risque de rxn croisees (signal non specifique) 2. qtte limites de serum 3. reproductibilite non garantie (heterogenite des lots) |
| LES AC MONOCLONAUX 1. generation IN VIVO ? | IN VIVO- immunisation successives par eg a un souris jusqua sacrifice pour extraire la rate et les ganglions dont on obtien multiples PLASMOCYTES diff |
| 1. generation IN VITRO? | 1. immortalisation des plasmocytes en fusionant avec des cellules tumorales pour donner des HYBRIDOMAS 2. dilution limite (1 cellule par puit) 3. culture cellulaire 4. tests des surnageants (Ac) et selection des clones d'interets 5. production a grande echelle 6. cryopreservation des clones |
| 2. Avantages? | un seul Ac par clone (limite les rxn croisees) qtte illimitees et homogene |
| 3. inconvenients? | long, couteux, resultat incertain souvent donne des signaux plus faibles que les polyclonaux |
| IHC ET ICC l'acces de l'Ac a l'Ag depend de 3 facteurs | 1. type de prelevement tissulaire/cellule 2. localisation de l'Ag (mbranaire/intracellulaire) 3. nature de la fixation |
| l'acces de l'Ac a l'Ag est comment pour 1.une coupe en congelation ? | -situation souvent le plus simple -pas de pb liees a la localisation de l'Ag -differentes post-fixations possible |
| 2. une cellule | -situation intermediaire -permeabilization membranaire si l'Ag est intracellulaire |
| 3. du tissus fixees et inclus en paraffine | -situation parfois difficile -fixation definitive -technique de demasquage antigenique |
| demasquage antigenique? | anticorps reconnaissant l'epitope mais l'epitope est inaccessible |
| eg de technique pour le demasquage antigenique | -digestion partielle a la trypsine -chaleur : modification conformationelle -digestion partielle + chaleur |
| etapes d'une IHC directe | 1. incubation Ac primaire couplee a un traceur 2. lavages 3. lecture |
| en IHC directe le traceur est un ?? donnez un eg | -un fluorochrome -isothiocyanate de fluoresceine |
| la lecture se fait comment | directe sous l'UV avec un microscope a fluorescence |
| avantages du immunofluorescence | - simplicte -sensibilite -double marquage -IF directe (cytometrie) ou indirecte -peu de bruit de fond -proportionalite (quantification) |
| inconvenient de l'IF | fond noir |
| la microscopie a fluorescence marche comment? | -systeme d'excitation UV via lampe a mercure -fluorochrome (marquage de la preparation) -systeme de detection : oeil, camera |
| interets de ce microscope | -etude de cellules fixees (ICC, IHC, HIS) -etudes de fluorescence sur cellules vivantes |
| la microscopie marche comment? | -forme de microscope a fluorescence -platine motorisee -avec traitement bio-informatique, reconstruction en 3D possible (X,Y,Z) |
| quel est le principe general pour une IHC en ME ou ImmunoGold | 1. incubation Ac primaire 2. lavages 3. incubation PROTEINE A-OR COLLOIDAL 4. lavages 5. lecture |
| les particules d'or en ME sont visibles entre quel diameter? | entre 1 a 20 nm de diametre |
| example de ME ImmunoGold | particule d'or |
| etapes du IHC en plusieurs couches | 1. incubation Ac primaire 2. lavages 3. incubation Ac secondaire marquee 4. lavages 5. lecture |
| si on utilise le fluorochrome comme traceur, la lecture se fait comment? | directe sous l'UV (microscope a fluorescence) |
| mais le plus souvent on utilise un enzyme comme traceur qui permet une rxn coloree de quel type? | de type peroxydase ou phosphatase |
| pour eg si on utilise du peroxydase comme traceur on a quoi apres une rxn avec du substrat chromogene (DAB) + H2O2? | ppt brun insoluble |
| le principe d'amplification par complexe avidine-biotine a quoi comme but? | augmenter la detection d'un signal de faible intensite |
| les etapes a suivre pour une amplification avidine-biotine | |
| anticytokeratines ? | -marqueur des cellules epitheliales - ectoblastique+++ - endoblastique+++ - mesoblastique+++ |
| antivimentine? | -marqueurs des c. d'origines mesoblasique (non epitheliale, epitheliale, musculaire) |
| antidesmine? | marqueurs des cellules musculaires |
| antiproteine acide fibrillaire gliale ou anti GAFP? | -marqueurs de certaines cellules gliales (asctrocytes, ependymocytes) du SNC |
| anti-Ki67? | cellules en cycles (sauf en G0) |
| anti chromogranine? | Ag associee a la presence de vesicule endocrines |
| anti alpha actine musculaire lisses | -c. musculaires lisses -myofibroblastes -c. myoepitheliales |
| anti synaptophysines? | certains neurones |
| l'immunocytochimie peut etre il realiser en phase liquide? | oui (cellule sanguine, cellule en suspension) |
| peut etre il analyser par systeme automatisees? | oui (cytometrie en flux) |
| donnees quantitatives possible? | oui par les % de cellules marquees |
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