Medios de cultivo

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PREPARACIÓN DE REACTIVOS 4IM5
Valeria Aide Martínez García
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Valeria Aide Martínez García
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Resource summary

Medios de cultivo
  1. ¿Qué es?

    Annotations:

    • Es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos.
    1. Clasificación
      1. Según su origen
        1. Naturales

          Annotations:

          • Son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce exactamente.
          1. Sintéticos

            Annotations:

            • Son los medios que contienen una composición química definida cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
            1. Semisintéticos

              Annotations:

              • Son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
        2. Según su consistencia
          1. Líquidos

            Annotations:

            • Se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.
            1. Sólidos

              Annotations:

              • Se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g / litro.
              • El agar es una sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo y presenta la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio líquido".
              1. Semisólidos

                Annotations:

                • Contiene 7,5 g de agar / litro de caldo Se utilizará para determinar la motilidad de las especies en estudio.
          2. Según su composición
            1. Comunes o universales

              Annotations:

              • Su propósito es el crecimiento de la mayor parte de los microorganismos poco específicos.Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener colonias microbianas. Por ejemlo: agar común o caldo común.
              1. Enriquecidos

                Annotations:

                • Están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.
                1. Selectivos

                  Annotations:

                  • Son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el fin de inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas. Por ejemplo Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos estafilococos).
                  1. Diferenciales

                    Annotations:

                    • Son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios géneros y especies de microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha añadido un carbohidrato y un indicador y la bacteria que se cultiva es capaz de fermentar dicho carbohidrato, se produce una acidificación del medio con el consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH.
                    1. De enriquecimiento

                      Annotations:

                      • Son medios líquidos que contienen un agente que inhibe las especies no deseadas pero que favorece el crecimiento irrestricto del agente infeccioso.
                      1. De transporte

                        Annotations:

                        • Son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin multiplicación significativa de los microorganismos desde el momento de su extracción hasta su posterior estudio. Se   utilizan generalmente cuando las muestras deben ser enviadas de un laboratorio a otro.
            2. Factores selectivos que alteran las condiciones del medio
              1. Cambio de pH

                Annotations:

                • Por ejemplo agregando ácido acético para favorecer el crecimiento de Lactobacillus (pH final: 5,4 que es hostil par la mayoría de las especies que crecen entre 6,5 y 7,2). Los hongos crecen entre pH 4 y 6 y S. faecalis a pH 9,6.
                1. Cambio de temperatura

                  Annotations:

                  • La mayoría de las bacterias crece óptimamente entre 20o C y 40o C. Los cultivos típicos de S. Faecalis requieren 60o C de temperatura y los de Listeria son capaces de desarrollarse y crecer a 4o C.
                  1. Alteraciones osmóticas:

                    Annotations:

                    • Se acrecientan las propiedades osmóticas un medio con el agregado de cloruro de sodio. Estos medios intensifican la selección de bacterias halófilas como Staphylococcus spp. (7,5%).
                    1. Ajuste en la tensión de oxígeno:

                      Annotations:

                      • Es importante en la selección de aerobios y anaerobios.
                      1. Ajuste en la tensión de anhídrido carbónico:

                        Annotations:

                        • Muchos patógenos importantes pueden ser cultivados a menos que se eleve la tensión más allá de la atmosférica.
              2. Factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables
                1. Antisépticos:

                  Annotations:

                  • Sustancias antibacterianas inespecíficas que pueden actuar como inhibidores. Por ejemplo: el medio de cultivo comercial S - S (Salmonella - Shigella) que contiene verde brillante (inhibe las bacterias grampositivas) y sales biliares (que inhiben un gran número de gramnegativas menos enterobacterias).
                  • Otro ejemplo es el medio de Mc Conkey que contiene cristal violeta (inhibe las grampositivas pero no las enterobacterias)
                  1. Antibióticos:

                    Annotations:

                    • Sustancias antibacterianas específicas que impiden el crecimiento de aquellos microorganismos que no nos interesa que crezcan en ese medio. Un ejemplo es el medio de Thayer - Martin con VCN (vancomicina, colistina y nistatina) que se utiliza para el aislamiento de gonococos.
                    • La penicilina en una concentración de 5,50 unidades/ ml inhibe la mayoría de las grampositivas. Otro ejemplo es el medio de Sabourand - cloranfenicol para el aislamiento de Cándida albicans.
                2. Constituyentes habituales
                  1. Agua

                    Annotations:

                    • Sirve como solvente para la preparación del agente solidificante
                    1. Agar

                      Annotations:

                      • Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo.
                      1. Extractos

                        Annotations:

                        • Producen un medio de cultivo adecuado.
                        1. Peptonas

                          Annotations:

                          • Son soluciones acuosas donde se desarrollan los microorganismos.
                          1. Fluidos corporales, sangre o plasma

                            Annotations:

                            • Facilitan el desarrollo de algunos microorganismos exigentes
                            1. Sistemas amortiguadores

                              Annotations:

                              • Se utilizan para mantener el pH del medio en un determinado valor
                              1. Indicadores de PH

                                Annotations:

                                • Nos ayudan a detectar cambios de pH
                                1. Agentes reductores

                                  Annotations:

                                  • Permiten el desarrollo de los gérmenes Microarofilicos y anaerobios. Cisteína y tioglicolato.
                                  1. Agentes selectivos

                                    Annotations:

                                    • Inhiben el crecimiento de ciertos grupos de microorganismos.
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